角膜病是世界范围内的严重致盲眼病之一,角膜移植是目前帮助角膜盲患者恢复视力的重要的手段.但是,由于角膜材料供体匮乏,我国每年仅能施行角膜移植2000例左右.因此,最大程度地获得适用的角膜材料,拓展供体来源,成为角膜移植亟待解决的重要课题.由于供体角膜的严重缺乏,人工角膜又有其局限性,而且到目前为止尚有许多严重的并发症无法解决.随着生物材料学、细胞生物学、分子生物学及临床医学的不断发展,促使组织工程技术的兴起和发展.组织工程角膜(tissueengineering of cornea)正是适应这种需要而产生的.组织工程角膜是应用生物材料和角膜的三种细胞,通过三维培养技术,获得培养重建的角膜.应用组织工程角膜为供体进行角膜移植将是解决供体匮乏的理想途径.随着加拿大Griffith等(2001)体外培养人角膜等效物的成功,应用组织工程技术构建角膜开辟了新的道路,这一课题己成为眼科界研究的热点.组织工程角膜为应用生物材料和角膜的三种细胞,通过三维培养技术,获得培养重建的角膜.其成功的关键在于选择合适的组织工程材料来使种子细胞生长增殖,形成近似体内的正常结构.组织工程材料必须满足以下几点:1.具有优良的生物相容性和组织相容性;2.在机体内可逐渐降解吸收,降解和吸收的速度与组织细胞的生长繁殖速度相匹配;3.构建的三维空间能为细胞提供营养、气体交换和生长代谢的场所,具有适当的孔径和含水率;4.可按组织、器官缺损的情况进行塑型,要有好的力学性能.本实验尝试新型可降解三乙烯基交联剂与乙烯基吡咯烷酮(N-vinylpyrrolidinone,NVP)交联;以及利用壳聚糖与胶原蛋白复合材料为主要成分制备生物材料,分别植入兔角膜层间观察生物材料在角膜内生物学反应,同时以壳聚糖-胶原-粘多糖共混膜为载体,用兔角膜三种细胞进行体外培养.在此基础上,采用壳聚糖-胶原-粘多糖共混膜为载体培养兔角膜上皮细胞后进行板层角膜移植的动物实验研究.键作用,以提高其亲水性以利于提高材料的生物相容性.胶原没有抗原性、生物相容性好、可参与组织愈合过程,它已经成功地应用做为组织的引导材料,多年来的研究结果表明胶原可作为角膜细胞的培养基质,但胶原材料具有降解快、机械强度小等缺点,我们采用聚环氧化物交联的方法,此方法即不会引入明显的毒性,而又可获得理想的交联效果改善胶原材料的生物学性能,提高其促进细胞粘附和增殖功能.本实验首次将壳聚糖-胶原-粘多糖膜引入组织工程角膜的研究.