背景:血吸虫病(schistosomiasis)作为一种历史悠久的寄生虫病,威胁着74个国家约2亿人的健康。肝脏纤维化是日本血吸虫病慢性期主要表现,该状态持续存在最终导致肝硬化、门静脉高压等并发症,情况严重甚至造成患者死亡。吡喹酮是目前治疗血吸虫病的一线药物,但其耐药性已经突显。预防、缓解甚至逆转日本血吸虫所致肝脏纤维化,改善患者的生活质量,降低患者的死亡率仍是当今急需解决的问题。肝脏巨噬细胞是血吸虫肉芽肿的主要来源细胞,血吸虫虫卵抗原(soluble egg antigen,SEA)诱导巨噬细胞替代活化,称为M2型巨噬细胞。在急性期,M2型巨噬细胞通过减少促炎因子的产生,防止虫卵诱导急性炎症病变;在慢性阶段,M2型巨噬细胞分泌促纤维化细胞因子,诱导肝脏纤维化。目前已有研究表明,M2型巨噬细胞在慢性肝脏肉芽肿形成以及肝纤维化过程中起至关重要的作用。CHOP(CCAAT/增强子结合同源蛋白)是内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ER stress)的特异转录因子,与纤维化的形成密切相关。在CHOP-/-动物纤维化模型中观察到M2型巨噬细胞的浸润的减少,体现在M2型巨噬细胞分化减少,提示巨噬细胞可能通过CHOP调控其活化方向,改变其表型,进一步参与组织纤维化的疾病进程。然而,在日本血吸虫引起肝纤维化过程中,CHOP的作用尚未见相关报道。本研究以CHOP为研究目标,使用日本血吸虫阳性尾蚴感染C57BL/6小鼠诱导小鼠肝纤维化模型,确证CHOP参与日本血吸虫所致巨噬细胞极化,探讨CHOP对肝脏纤维化的影响及其作用机制,为预防肝脏纤维化药物开发提供新的潜在作用靶点。目的:探讨CHOP蛋白参与日本血吸虫所致巨噬细胞极化及其对肝脏纤维化的影响和作用机制,为预防肝脏纤维化药物提供新的可能性作用靶点。方法:建立日本血吸虫病肝纤维化动物模型。将8周龄SPF级雌雄数目各半的C57BL/6小鼠,随机分为对照组和感染组。感染组小鼠经腹部皮肤贴片法感染日本血吸虫阳性尾蚴,感染后6、10周分别处死小鼠,收集小鼠肝脏标本和血清标本。(1)制作肝脏石蜡切片,进行HE染色和MASSON胶原纤维染色,分析肝脏切片中虫卵肉芽肿平均面积大小及胶原纤维表达含量高低;(2)通过免疫组化实验检测血吸虫感染后6、10周小鼠肝脏中CHOP和Fibronectin蛋白的表达变化;(3)通过免疫荧光实验观察血吸虫感染后6、10周小鼠肝脏中CHOP在M2型巨噬细胞中的表达情况;(4)提取肝脏蛋白,Western Blot检测血吸虫感染后6、10周小鼠肝脏中CHOP、KLF4、STAT6、pSTAT6蛋白的表达变化;(5)提取肝脏RNA,RT-qPCR检测血吸虫感染后6、10周小鼠肝脏中CHOP、STAT6、KLF4、IL-13Rα、IL-4Rα1基因在转录水平的表达变化;(6)收集小鼠血清,ELISA检测血吸虫感染后6、10周小鼠血清中IL-13、TNF-α蛋白含量变化。结果:日本血吸虫尾蚴感染小鼠6、10周后,与对照组相比:(1)小鼠肝指数(肝指数=小鼠肝脏湿重/小鼠体重×100%)显著增加(P<0.05,P<0.01);(2)肝组织虫卵肉芽肿平均面积明显增大(P<0.01),肝脏胶原纤维沉积呈现时间依赖性增加趋势(P<0.01,P<0.01);(3)小鼠肝组织胶原纤维表达量均增加(P<0.01);(4)CHOPmRNA和蛋白水平的表达均呈现时间依赖性增加(P<0.01,P<0.01);(5)小鼠肝脏中巨噬细胞浸润呈现时间依赖性增加,表现在CHOP+F4/80+巨噬细胞数目增加,并且以CHOP+CD206+巨噬细胞为主;(6)小鼠肝脏中KLF4蛋白的表达降低(P<0.01),pSTAT6蛋白的表达增加(P<0.01),IL-13Rα1mRNA表达在感染后6和10周增加(P<0.05,P<0.01),IL4Rα mRNA表达在10周增加(P<0.01)而在6周无明显变化;(7)小鼠血清中TNF-α含量在感染后6周和10周增加(P<0.01),血清中IL-13含量在感染后10周增加(P<0.01)而在感染后6周无明显变化。结论:(1)CHOP促进日本血吸虫所致肝纤维化的发生和发展;(2)CHOP可能通过促进巨噬细胞的选择性活化介导日本血吸虫诱导的肝纤维化。