【摘 要】
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该研究旨在探讨自杀基因治疗对口腔鳞癌的体内外治疗作用及治疗机理,以及如何提高自杀基因治疗口腔鳞癌的疗效.第一部分,复制缺陷重组腺病毒感染口腔鳞癌Tca8113细胞株转基因
【出 处】
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中山医科大学 中山大学中山医学院 中山大学
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该研究旨在探讨自杀基因治疗对口腔鳞癌的体内外治疗作用及治疗机理,以及如何提高自杀基因治疗口腔鳞癌的疗效.第一部分,复制缺陷重组腺病毒感染口腔鳞癌Tca8113细胞株转基因效率的测定及自杀基因的表达.为了研究含CMV启动子的复制缺陷型重组病毒对口腔鳞癌细胞的转染能力和目的基因的表达能力,该部分采用透射电镜、RT-PCR等技术进行研究.结果显示,该文研究采用的复制缺陷型重组腺病毒具有高的滴度,能以高的转染率转染口腔鳞癌细胞并能表达自杀基因.第二部分,复制缺陷型重组腺病毒介导HSV-TK-GCV自杀基因系统治疗口腔鳞癌Tca8113细胞株的研究.结果表明HSV-TK-GCV系统对口腔鳞癌细胞具有一定的杀伤作用,杀伤作用呈GCV浓度和时间依赖性.HSV-TK-GCV系统治疗口腔鳞癌细胞后可将GCV代谢为磷酸化的GCV,并可能通过抑制DNA的合成,阻断细胞周期于S期,从而对口腔鳞癌细胞产生杀伤作用.第三部分,复制缺陷型重组腺病毒介导CD/5-FC自杀基因系统治疗口腔鳞癌Tca8113细胞株的研究.结果表明CD/5-FC系统对口腔鳞癌细胞具有强的杀伤作用和旁观者效应,杀伤作用呈5-FC剂量依赖性,CD/5-FC系统治疗口腔鳞癌细胞后将5-FC代谢为5-FC,并可能通过的抑制DNA的合成,阻断细胞周期于S期,以及诱导细胞凋亡,从而对口腔鳞癌细胞产生杀伤作用.第四部分,提高自杀基因系统治疗疗效的研究.一、诱导分化剂提高HSV-TK/GCV自杀基因系统旁观者效应的研究;结果表明8-Br0-cAMP对口腔鳞癌细胞具有一定的诱导分化作用,并可上调间隙连接蛋白Cx43基因的表达以及间隙连接的形成,8-Br0-cAMP可提高HSV-TK/GCV系统旁观者效应.二、自杀基因联放射治疗口腔鳞癌的研究.为了研究自杀基因系统对放射治疗的增敏作用,该部分进行了以下的研究:口腔鳞癌细胞经自杀基因系统治疗后给予不同剂量的放射治疗,采用克隆形成实验检测各组放射治疗后的克隆形成及细胞生存曲线.结果显示自杀基因治疗后可增强放射治疗对口腔鳞癌细胞的疗效.
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