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目的:观察溶酶体膜通透性在麦冬黄烷酮F(58-F)保护肝细胞中的作用。 方法： (1)CCl4造模，建立急性肝损伤模型，并用58-F预处理。通过生化方法检测肝功能ALT、肝组织MDA含量;HE染色检测小鼠病理;ELISA法检测TNF-α含量;Western-blot方法检测羰基化蛋白含量(PCC)、溶酶体相关膜蛋白-1(LAMP1)蛋白含量;Real time-PCR法检测LAMP1 mRNA表达。 (2)培养小鼠胚胎肝细胞BNL CL.2，建立H2O2细胞损伤模型并用58-F预处理，CCK8检测细胞活力，AnnexinⅤ/PI染色，流式细胞仪检测细胞死亡，BrdU掺入检测细胞增殖，荧光探针DCFH-DA检测活性氧(ROS)的生成，吖啶橙染色、Lyso-trackerGreen探针标记，激光共聚焦显微镜拍照。提取总蛋白，Western-blot方法检测PCC、LAMP1、组织蛋白酶B(CTSB)、组织蛋白酶D(CTSD)表达，提取胞质蛋白，Western-blot方法检测CTSB、CTSD表达，CTSB蛋白活性变化。Real time-PCR法检测LAMP1 mRNA表达。 结果： (1) ALT结果显示:与对照(Control，Con)组相比，模型(Model，M)组小鼠血清ALT显著升高，与M组相比，58-F组ALT显著降低。 (2)HE染色结果显示:Con组肝细胞排列整齐，未见脂质空泡形成，中央静脉区未见肝细胞坏死及炎症细胞浸润;M组可见中央静脉区大面积肝细胞坏死、少量炎症细胞浸润。58-F用药组中央静脉区坏死细胞明显减少。 (3) TNF-α ELISA结果显示:与Con组相比，M组小鼠血清TNF-α含量显著升高，与M组相比，58-F组TNF-α含量显著降低。 (4) MDA含量检测结果显示:与Con组相比，M组小鼠肝组织MDA含量显著升高，与M组相比，58-F组MDA含量显著降低。 (5)体内Western blot结果显示:与Con组相比，M组小鼠PCC蛋白表达量显著增加，LAMP1蛋白表达量显著降低，与M组相比，58-F组PCC蛋白表达量显著降低，LAMP1蛋白表达量显著增加。 (6)体内Real time-PCR结果显示:与Con组相比，M组小鼠LAMP1 mRNA表达量显著降低，与M组相比，58-F组LAMP1 mRNA表达量显著增加。 (7) CCK8细胞活力结果显示:300μM、400μM、500μM的H2O2均能降低细胞活力，但500μM的H2O2作用2h后，对细胞活力的抑制率接近40％，50μM的58-F没有细胞毒性，且对500μM的H2O2诱导的细胞损伤有一定的保护作用。 (8)AnnexinⅤ/PI流式结果显示:与Con组相比，H2O2组细胞早期凋亡和晚期凋亡细胞显著增加，与H2O2组相比，58-F预处理12h组和58-F预处理36h组晚期凋亡细胞显著减少。 (9)BrdU检测结果显示，与Con组相比，H2O2作用8h后，肝细胞增殖明显减少，与H2O2组相比，58-F/H2O2组肝细胞增殖明显增加。 (10)ROS结果显示:与Con组相比，2h、4h H2O2组ROS含量显著增加，4h达到高峰，随后即下降，但仍较Con组含量高。而58-F/H2O2组各时间点ROS含量均比H2O2组显著下降。 (11)Lysotracker染色结果显示:随着模型的加重，与Con组相比，绿色荧光逐渐减弱，H2O2作用8h后，绿色荧光减至最弱，到H2O2作用24h后，绿色荧光有所增强。动态观察58-F/H2O2组显示比相应时间点H2O2组绿色荧光增强。 (12)Westem blot结果显示:M组PCC含量逐渐增加，8h表达最多，24h有所减少，58-F/H2O2组显示细胞中PCC含量比相应时间点H2O2组减少;与Con组相比，随着H2O2造模的进展，LAMP1蛋白表达量逐渐减少，8h表达最少，24h有所恢复，动态观察58-F/H2O2组显示细胞中LAMP1蛋白表达量比相应时间点H2O2组增加; Con组胞质中CTSB/D蛋白表达极少，随着H2O2造模的进展，CTSB/D蛋白表达量逐渐增加，8h表达最多，24h有所降低。动态观察58-F/H2O2组显示细胞质中CTSB/D蛋白表达量比相应时间点H2O2组减少。细胞总蛋白中各组CTSB/D蛋白表达量无明显差异。 (13)胞质CTSB活性检测结果显示:与Con组相比，M组活性显著增高，8h达最高，24h有所下降，动态观察58-F/H2O2组显示胞质中CTSB活性比相应时间点H2O2组降低。 (14) Realtime-PCR检测结果显示:与Con组相比，随着H2O2造模的进展，LAMP1 mRNA含量逐渐减少，24h有所恢复。动态观察58-F/H2O2组显示细胞中LAMP1 mRNA含量比相应时间点H2O2组增加。 (15)AO染色结果显示，随着模型的加重，吖啶橙染色后，红色荧光逐渐减弱，绿色荧光逐渐增强，H2O2作用8h后，红色荧光减至最弱，绿色荧光增至最强，到H2O2作用24h后，红色荧光有所增强，绿色荧光有所减弱。动态观察58-F/H2O2组显示比相应时间点红色荧光增强，绿色荧光减弱。 结论： (1)58-F能够减轻CCl4诱导的急性肝损伤，改善肝功能，减轻病理损伤，并能稳定溶酶体膜的糖蛋白。 (2)58-F能够保护BNL CL.2免受损伤，机制与上调溶酶体膜糖蛋白LAMP1表达、增加溶酶体膜的稳定性、减轻组织蛋白酶B/D渗漏，抑制胞质酸化相关。