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目的:硝呋莫司(Nifurtimox)是一种治疗锥型虫引起的寄生虫病查加斯病的有效药物。近些年因其在神经母细胞瘤(NB)治疗中表现出抗癌作用而受到广泛关注。本研究报告了硝呋莫司治疗后对人神经母细胞瘤细胞系增殖和凋亡的影响,并试图阐明其潜在的机制。方法:用硝呋莫司处理SH-SY5Y细胞后,通过CCK-8实验检测细胞增殖,筛选药物IC50浓度,后续在IC50下开展实验;应用CCK-8实验测定在选定浓度下硝呋莫司抑制SH-SY5Y生长的时间曲线;应用流式细胞仪和Western blotting检测凋亡表型和凋亡相关蛋白的表达;用DCFDA荧光分析法测定细胞内活性氧(ROS);应用Western Blotting检测MYCN的表达;将SH-SY5Y细胞接种于NCr裸小鼠皮下,分为用药组和对照组,分别给与硝呋莫司和生理盐水灌胃,观察肿瘤生长情况,并通过免疫组化检测用药组和对照组间细胞形态的差别。结果:0、5、10、15、20、25μg/ml的硝呋莫司处理48h后细胞的活性(%)为96.23±4.54、89.35±7.73、50.28±6.22、33.80±5.24、13.95±3.72、5.13±2.07,差异有显著性(P<0.05)。半抑制浓度(IC50)值为10.28μg/ml。0、10、20μg/ml的硝呋莫司处理48h后细胞的凋亡率显著升高(P<0.05),三组的凋亡率(%)分别为3.58±0.8、46.8±1.6、64.1±2.1;免疫印迹结果显示三个浓度(0、10、20μg/ml)的硝呋莫司处理48h后细胞中凋亡相关蛋白表达改变。cleaved Cas3/Cas3的表达量与GAPDH的比值分别为0.3±0.02、0.37±0.03、0.62±0.04,有显著性差异(P<0.05);Bax/GAPDA的表达量分别为0.15±0.01、0.71±0.03、0.85±0.03,差异有意义(P<0.05);Bcl2/GAPDA的表达量分别为0.6±0.01、0.58±0.02、0.55±0.01,差异具有明显统计学意义(P<0.05)。0和10μg/ml的硝呋莫司处理细胞后,ROS产生倍数(Fold Change)分别为1.0±0.04和1.48±0.22,组间差异有统计学意义(P<0.05)。免疫印迹显示,10μg/ml硝呋莫司处理后细胞表达的MYCN蛋白下降。体内培养后摘除肿瘤,免疫组化HE染色显示,患有NB的裸鼠经过硝呋莫司灌胃,肿瘤细胞发生形态学的变化,肿瘤成神经细胞核肥大消失。结论:硝呋莫司能够抑制SH-SY5Y细胞的增殖,促进SH-SY5Y细胞的凋亡。WesternBlotting检测发现,经过硝呋莫司处理后,促凋亡蛋白Caspase3、Bax表达增加,凋亡抑制蛋白Bcl2表达减低。此外,硝呋莫司处理过的细胞,细胞内活性氧增加,而细胞内活性氧也会促进凋亡。Western Blotting显示,硝呋莫司可抑制MYCN的表达。在裸鼠体内环境下,硝呋莫司同样可以通过抑制增殖和诱导细胞凋亡而抑制肿瘤进展。免疫组织化学显示,用药组和对照组相比,用药组肿瘤细胞呈现不同程度的凋亡。综上所述,硝呋莫司调节凋亡蛋白的表达,促进细胞内活性氧生成,诱导SH-SY5Y细胞在体内、体外的凋亡,抑制其增殖,有望成为一种治疗NB的潜在药物;此外硝呋莫司还抑制与NB高风险严重相关的MYCN的表达,为高危NB的治疗提供了新的途径。