骨保护素/脱蛋白骨对兔前交叉韧带重建腱—骨早期愈合的影响

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目的:观察骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/脱蛋白骨(deproteinized bone,DPB)复合物对兔前交叉韧带重建腱-骨早期愈合的影响。探讨此复合物对腱-骨愈合的作用效果及可能的机制,为前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)损伤治疗领域提供理论依据。方法:取新鲜新生小牛股骨干骺端松质骨,切成3mm×3mm×5mm大小的骨条,连续6次经20%过氧化氢、乙醚交替浸泡24h制备DPB。将DPB与OPG水溶液充分混合制备OPG/DPB复合物,低温保存备用。选取80只健康成年新西兰大白兔,雌雄不限,体重2.5~3.5Kg(由桂林医学院动物实验中心提供),随机分为4组,每组20只,即A组(OPG)、B组(DPB)、C组(OPG/DPB)及D组(对照)。用质量分数为10%的水合氯醛按3ml/kg体重耳缘静脉麻醉实验动物,每组实验动物均在直视下取自体跟腱重建左侧膝关节ACL。A组骨隧道内植入OPG,B组骨隧道内植入DPB,C组骨隧道内植入OPG/DPB,D组除ACL重建外不做其他处理,术中给予5万单位庆大霉素冲洗移植肌腱及关节腔预防感染,术后连续抗炎3日。术后观察实验动物一般情况,于术后第4、第8及第12周每组随机各处死6只实验动物并获取完整膝关节标本,行大体观察、生物力学检测及腱-骨界面组织学观察。结果:大体观察A、C组骨隧道内口逐渐由纤维结缔组织过渡为软骨组织再到骨样组织封闭;B、D组骨隧道内口骨化不明显,个别标本出现骨隧道扩大。生物力学检测术后4周,各组最大加载负荷组间比较差异无统计学意义(P>0.05);术后8周,C组最大加载负荷高于A组,A组最大加载负荷高于B、D组,A组与C组比较、A组与B组比较差异有统计学意义(P<0.05),B组与D组比较差异无统计学意义(P>0.05);术后12周,各组最大加载负荷组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。组织学观察术后4周,各组腱-骨界面为纤维结缔组织填充;术后8周,各组腱-骨界纤维结缔组织排列紧密,可见数量不等的Sharpey样纤维,以C组最明显;术后12周,各组腱-骨界面逐渐成熟,B、D组腱-骨界面形成连续性纤维软骨连接。A、C组腱-骨界面几乎全部由新生骨填充,C组形成带有“潮线”结构的腱-骨移行改变带。结论:OPG可促进ACL重建术后腱-骨早期愈合,OPG复合于DPB后效果更显著。
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