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目的:随着我国人口的老龄化与生活方式的变化,糖尿病(Diabetes mellitus,DM)从少见病演变成一种流行病。糖尿病肾病(diabetic nephr opathy,DN)是糖尿病慢性进展中的微血管病变之一,严重威胁人们的生命健康,是糖尿病病人致残与死亡的重要病因。DN的病理改变包含肾小球的硬化、肾小管间质出现纤维化以及肾血管病变;那么肾小管的损伤造成了肾间质纤维化,在DN过程中发挥着极其重要的作用。DN肾小管在病变的早期主要是肾小管的基底膜增厚、小管数目增加以及小管肥大,病变的后期则表现为肾小管的萎缩和间质的纤维化。在慢性的肾脏疾病进展中,肾间质纤维化是极其关键的病理改变基础,能够更好的反映肾脏损害的程度水平。因此,探讨改善肾小管的间质纤维化的方法,能够使间质的纤维化病变进展缓慢,在临床中对提高DN患者的预后具有非常重要的意义。Roscovitine是一种嘌呤类似物,通过对细胞周期蛋白依赖性激酶活性的抑制而发挥作用的。已证实Roscovitine具有多种药理作用,例如抗炎、抗增殖和抗纤维化。Roscovitine能通过抑制成纤维细胞中胶原蛋白、纤连蛋白和结缔组织生长因子的表达来体现显著的抗纤维化作用。本实验拟通过Roscovitine干预糖尿病小鼠的模型,观察Roscovitine对糖尿病肾病小鼠肾脏的保护作用和机制。方法:采用链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)在腹腔注射CD1小鼠,从而建立1型糖尿病小鼠模型,72h后测静脉血糖≥16.7mmol/L,并能维持1周且尿糖阳性者为造模成功,对照组(NC组)腹腔注射枸橼酸缓冲液。实验期间各组小鼠均自由饮食,不应用胰岛素或其他口服降糖药物。待DM组小鼠全部建模成功后,将DM组小鼠随机分成3组(n=5):(1)D M组;(2)Roscovitine低剂量处理组(RL组,每日腹腔注射20mg/kg用D MSO溶解的Roscovitine);(3)Roscovitine高剂量处理组(RH组,每日腹腔注射40mg/kg用DMSO溶解的Roscovitine)。上述各组DMSO终浓度均<0.1%。16周末处死实验小鼠收集血、尿及肾组织,采用日立的7170-A全自动的生化分析仪来检测血糖(Glu)、血尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、尿蛋白(Alb),并以肾脏重量(mg)/体重(g)作为肾脏指数(Kidn ey Index,KI),通过电镜、光镜、免疫组化及western blot等检测方法来评估Roscovitine对糖尿病肾病的影响。结果:通过实验小鼠所测生化指标结果表明,与NC组相比,DM组小鼠血糖明显升高,生化指标中血BUN、Scr、尿白蛋白均升高,同DM组相比,予以Roscovitine干预后,可以显著改善糖尿病小鼠的肾脏功能指标,血Scr、BUN、尿白蛋白及血糖水平均显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05),但不受Roscovitine浓度的影响。HE、PAS、以及透射电镜观察发现,在DM小鼠中,肾小球基底膜显著增厚,足细胞足突融合,数目减少。Roscovitine治疗后,可显著减轻肾小球病变。Masson染色结果显示,DM组小鼠肾间质纤维组织增生显著,Roscovitine治疗可明显减轻肾间质纤维化水平,并能够降低DM小鼠间质中Ⅲ型和Ⅳ型胶原的表达水平。与NC组相比,DM组小鼠肾间质中α-SMA的表达水平显著增高,而E-cadherin的表达显著降低;Roscovitine治疗后对肾小管上皮细胞间质转分化有明显抑制作用,减低了α-SMA表达并增高了E-cadheri n表达,同时显著降低DM小鼠肾组织中TGF-β1的表达。结论:1.Roscovitine可显著减轻糖尿病小鼠的高血糖状态,改善糖尿病肾病小鼠肾小球损伤和肾功能;2.Roscovitine可显著降低糖尿病小鼠肾间质纤维化程度,其作用机制与下调TGF-β1信号通路有关。