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[目的与背景]食管癌是最常见的恶性肿瘤之一,其发病率在全世界恶性肿瘤中居第9位,在我国居第5位,其死亡率在全球范围内居第8位,在我国居第4位。我国食管癌以食管鳞状细胞癌为主(简称食管鳞癌,esophageal squamous cell carcinoma,ESCC),占食管癌的90%以上。早期食管癌手术切除后5年生存率可达85%-90%,但因其缺乏典型的临床症状而难以早期诊断治疗。大部分患者在出现吞咽困难或转移症状时才去就诊,此时多已经处于中晚期,5年生存率仅为60%-15%。为了改善食管癌的预后,在评估及诊疗方面的分子技术尚有待改进。由于癌细胞通常具有逃避凋亡的进化机制,因此与细胞凋亡途径相接合的诊疗手段充满前景。凋亡抑制因子(inhibitor of apoptosis proteins,IAPs)阻碍了细胞凋亡,这与肿瘤侵袭、进展、治疗失败和预后不良有关。肿瘤细胞高表达IAPs是导致肿瘤细胞抵抗凋亡的关键。人类第二线粒体源性胱氨酸酶激活因子(Second mitochondria-derived activator of caspase,Smac)是凋亡途径中的一种重要蛋白,通过消除IPAs对胱天蛋白酶(cysteine aspartate-specific proteases,caspase)的抑制发挥促凋亡作用,因此Smac被认为是食管癌治疗的潜在靶点之一。阐明Smac在食管鳞状细胞癌侵袭中的表达情况、生物学功能及临床意义可能具有重要的价值。本课题通过免疫组织化学方法检测Smac在食管鳞癌组织、癌旁组织及正常食管组织中的表达情况,探讨其与临床病理特点之间的关系,并通过转染上调Smac在食管鳞癌细胞ECA109中的表达,验证Smac对食管鳞癌细胞体外侵袭行为的调控作用。[材料与方法]收集山大二院2015年1月至2016年8月期间手术切除的食管鳞癌组织、癌旁组织和正常食管组织共68组,常规石蜡包埋切片,通过免疫组织化学方法检测Smac食管鳞癌组织及对应癌旁组织和正常组织中的表达情况,运用X2检验分析Smac的表达与食管鳞癌患者临床病理参数的关系。通过qRT-PCR获取Smac蛋白的cDNA,从琼脂糖凝胶中回收靶片段,构建含Smac基因片段的真核表达载体pcDNA3.1-Smac,通过瞬时转染技术获得稳定高表达Smac的食管鳞癌细胞株 ECA109/pcDNA3.1-Smac(ECA109/Smac 组)和对照组 ECA109/pcDNA3.1(ECA109/对照组),并设立空白对照(ECA109组)。采用Western blotting技术验证Smac蛋白水平的过表达率。采用transwell小室检测Smac对食管鳞癌细胞体外侵袭能力的调控作用。[实验结果]根据免疫组化结果,食管鳞癌组织中的Smac阳性率为54.41%,明显低于癌旁组织和正常食管组织Smac的表达率(分别为89.71%,92.65%;P<0.05),Smac的表达水平与食管鳞癌的TNM分期、浸润深度、淋巴结转移情况显著相关(P<0.05),与年龄、性别、分化程度无关(P>0.05)。Western blotting显示,ECA109/Smac组的Smac蛋白表达升高。Transwell侵袭实验表明与ECA109/对照组和ECA109组相比,ECA109/Smac组的细胞侵袭能力降低(P＜0.05)。[实验结论]食管鳞癌组织中的Smac明显降低,上调Smac的表达后,食管鳞癌细胞的侵袭能力降低,表明Smmac在食管鳞癌的发生发展及转移中发挥重要的作用,进一步研究Smac的生物学特性可能有益于治疗食管癌。