利用原生质体技术选育碱性几丁质酶高产菌株

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灰褐链霉菌(S. griseofuscus)S1001可以产生碱性几丁质酶。 本论文分为两部分:第一部分主要通过原生质体的制备率、泄露率、再生率研究了灰褐链霉菌S1001原生质体制备、再生的条件:菌丝生长的对数期后期(41小时)是制备原生质体的最佳材料;甘氨酸对溶菌酶的脱壁作用没有辅助作用;溶菌酶的浓度为10mg/ml;酶解时间1小时;酶解温度25℃;能够有效地的形成和保持原生质体的高渗p溶液中含25mM MgCl2、10mM CaCl2。第二部分通过紫外线、MNNG对灰褐链霉菌原生质体诱变、筛选,选出了突变株M13,其产碱性几丁质酶的能力为15.2U/ml,比出发菌株提高了近6倍,研究还表明,与对照试验相比,原生质体技术诱变所用剂量均远远小于菌体诱变所用剂量,但是诱变结果却具有突变率高、正变幅度大等优点,是一种简便、实用、高效的诱变技术。
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