【摘 要】
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目的:基于Treg/Th17免疫平衡探索中药黄芪的有效成分黄芪多糖治疗变应性鼻炎豚鼠模型的机制,试图扩张变应性鼻炎发病机制常见的Th1/Th2稳态失衡外的机制研究边界,同时探讨黄芪多糖对豚鼠Treg/Th17相关细胞因子Foxp3和RORγt及血清中IL-17的表达水平影响,部分诠释中药单体黄芪多糖治疗变应性鼻炎的作用机制。方法:按照随机、对照、前瞻性研究的方法,将60只健康的雄性豚鼠随机分为A、
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目的:基于Treg/Th17免疫平衡探索中药黄芪的有效成分黄芪多糖治疗变应性鼻炎豚鼠模型的机制,试图扩张变应性鼻炎发病机制常见的Th1/Th2稳态失衡外的机制研究边界,同时探讨黄芪多糖对豚鼠Treg/Th17相关细胞因子Foxp3和RORγt及血清中IL-17的表达水平影响,部分诠释中药单体黄芪多糖治疗变应性鼻炎的作用机制。方法:按照随机、对照、前瞻性研究的方法,将60只健康的雄性豚鼠随机分为A、B、C、D、E共5组(A黄芪多糖注射治疗干预组、B黄芪多糖喷鼻治疗干预组、C糖皮质激素喷鼻组、D变应性鼻炎模型组、E正常对照组)。参照经典造模方法,A组、B组、C组、D组予以基础致敏:卵清蛋白(ovalbumin,OVA)0.3mg+氢氧化铝30mg+生理盐水1mL现配现用的混悬液,腹腔内隔日注射7次,局部激发:基础致敏结束后第一天即以每侧50μL的2%OVA溶液滴鼻7天,每日1次。E组即正常对照组同期以氢氧化铝30mg+生理盐水1mL等量生理盐水腹腔注射,用同量生理盐水滴鼻局部激发。模型制备后予以行为学评分判定,淘汰各组死亡脱落及不合格的豚鼠。A组予以腹腔注射黄芪多糖注射液10mg/Kg,每天一次,连续三周。B组,将黄芪多糖注射液溶于生理盐水制备溶液,按照1mg/kg喷鼻,每日喷鼻1次。C组,以布地奈德喷鼻治疗,剂量20ug/kg,每日喷鼻1次。D组、E组以等量生理盐水代替喷鼻每日1次。采用叠加量化记分法进行行为学评分,采用免疫组织化学法检测豚鼠鼻黏膜中与Treg/Th17细胞密切相关的细胞因子Foxp3和RORγt的表达,酶联免疫吸附法检测豚鼠血清中IL-17的表达。整理所得实验数据,计量资料以均数±标准差(?x±)表示,运用SPSS22.0、Excel 2019软件进行统计学分析,多组独立样本若都服从正态分布,则采取单因素方差分析,组间的两两比较采取SNK检验,若不全符合正态分布,采取K组独立秩和检验(KruskalWallis H);两配对样本,若差值服从正态分布,采用配对t检验,若差值不服从正态分布,采用Wilcoxon符号秩和检验(配对秩和检验);相关性分析采取Spearman相关检验;以P<0.05为有统计学意义。结果:(1)A组(黄芪多糖注射治疗干预)、B组(黄芪多糖喷鼻治疗干预)、C组(糖皮质激素喷鼻)鼻粘膜中Foxp3阳性细胞率明显高于E组(正常对照),RORγt阳性细胞率低于E组,血清中IL-17表达浓度明显高于E组,差异有统计学意义(P<0.01),但较D组(变应性鼻炎模型)IL-17的浓度显著降低(P<0.05);(2)A组、B组、C组之间的鼻粘膜Foxp3、RORγt指标以及血清中IL-17的浓度,其差异无统计学意义(P>0.05)。结论:黄芪多糖可以上调豚鼠鼻黏膜中Foxp3表达水平,下调鼻黏膜RORγt的表达水平,纠正Treg/Th17细胞的失衡,并抑制IL-17产生,从而减轻变应性鼻炎症状缓解鼻部炎性反应。
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