控制植物一切生理生化现象的基因都受相关启动子的调控,启动子在调控基因的表达时扮演着重要角色,甚至起着决定性的作用;植物在面对不利环境时,为了提高自身抵抗能力,会针对环境调控相关基因的表达,这些基因的表达在时空层面上都是由启动子控制着的,对启动子功能研究能更清楚了解植物应对逆境胁迫时的调控机制。本研究以野生型烟草NC89为实验材料,在建立NC89再生体系和农杆菌介导的烟草遗传转化体系优化的基础上,获得了翅碱蓬脱水素基因（Ss DHN）启动子截短片段的转基因愈伤组织及转基因植株,通过GUS（β-葡糖苷酸酶基因）染色和PCR验证转基因材料,在茉莉酸甲酯、水杨酸、脱落酸的胁迫处理下,初步验证启动子功能。研究结果如下:1.烟草再生体系的建立愈伤组织诱导培养的激素配比:IBA 0.1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+6-KT 0.3 mg/L,愈伤组织增殖培养的激素配比:NAA 0.15 mg/L+6-BA 0.6 mg/L+6-KT 0.3 mg/L,芽诱导培养的激素配比:IBA 0.6 mg/L+6-BA 0.6 mg/L+6-KT 0.5 mg/L,芽增殖培养的激素配比:IBA 0.6 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+6-KT 0.6 mg/L,生根培养的激素配比:IBA 0.3 mg/L+NAA 1.2 mg/L。2.农杆菌介导烟草遗传转化体系的优化转基因烟草筛选的潮霉素浓度为30 mg/L,菌液OD₆₀₀=0.6时,稀释5倍用于浸染,浸染时间为5 min。3.转基因烟草的鉴定通过GUS染色和PCR成功鉴定了含有碱蓬脱水素启动子截短片段的DM 1、DM 2、DM 3、DM 4的愈伤组织;筛选出DM 2、DM 3转基因烟草,并对转基因烟草T1代植株成功鉴定。4.Ss DHN启动子功能验证SA能显著诱导GUS基因的表达,在DM 1启动子的-851～-404 bp含有未知的SA应答元件能正调控GUS基因的表达;Ss DHN启动子-289～-1 bp存在某些未知的响应SA信号的元件,或存在SA能与其它激素相互作用来间接影响GUS基因的表达量。Me JA正调控GUS基因的表达,尤其是存在Me JA响应元件的DM 1启动子上;Ss DHN启动子-404～-1 bp之间可能存在某些直接或间接响应Me JA信号的元件。ABA能正调控GUS的表达,ABA对GUS的表达调控有重要作用。ABA响应元件很可能与其它元件共同作用调控GUS基因的表达。