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本文应用分离纯化的条斑紫菜多糖精品,通过小鼠体外和体内系列实验,对条斑紫菜多糖的生物学活性进行了研究。条斑紫菜多糖生物活性实验研究包括:条斑紫菜多糖对睾丸支持细胞的作用、对脾淋巴细胞生长的影响、对多种人肿瘤细胞的作用以及对四氯化碳诱导的急性肝损伤的保护作用。
首次研究了条斑紫菜多糖对大鼠睾丸支持细胞的增殖作用。通过实验发现,条斑紫菜多糖对大鼠睾丸支持细胞生长增殖具有明显的促进作用,并且这种促进作用随着条斑紫菜多糖浓度提高而越加明显。当浓度为0.05mgml-1(低浓度组)时,其增殖率达到了125.9%(p<0.01),当浓度为10mg.ml。时(高浓度组),其增殖率具有明显激增作用,高达354.5%(p<0.01)。尽管激增机理目前还不十分清楚,但为今后支持细胞与其它功能细胞的联合移植以及提高精子质量及男性不育症的治疗有着重要指导意义。
体外培养条件下分别用不同浓度的条斑紫菜多糖以及条斑紫菜多糖与ConA或LPS协同处理小鼠脾淋巴细胞,通过MTT法观察条斑紫菜多糖对小鼠脾淋巴细胞生长的影响。采用流式细胞仪检测小鼠脾淋巴细胞的细胞周期变化。实验结果发现条斑紫菜多糖处理小鼠脾淋巴细胞72h后对其生长有明显促进作用,且呈剂量依赖效应,0.25mg·ml-1,0.5mg·ml-1和1mg·ml-1条斑紫菜多糖处理小鼠脾淋巴细胞后,小鼠脾淋巴细胞的存活率分别为157.5%,162。1%和173.4%(p<0.01)。条斑紫菜多糖与ConA或LPS共同处理小鼠脾淋巴细胞时,小鼠脾淋巴细胞的存活率高于ConA和LPS单独的作用,表现出明显的协同效应。流式细胞仪检测表明条斑紫菜多糖可以促进小鼠脾淋巴细胞从G1期进入S期,表明条斑紫菜多糖可以促进小鼠脾淋巴细胞生长,为今后研究多糖提高机体免疫力的作用机理奠定了坚实的基础。
体外培养条件下分别用不同浓度的条斑紫菜多糖处理四种人肿瘤细胞,通过MTT法观察条斑紫菜多糖对四种人肿瘤细胞生长的影响。采用流式细胞仪检测肿瘤细胞的细胞周期变化。结果发现条斑紫菜多糖诱导HO-8910、MCF-7、K562和SMMC-7721肿瘤细胞72h后对其生长有明显的抑制作用,呈剂量依赖效应,500mg·L-1条斑紫菜多糖对四种肿瘤细胞的抑制率分别为21.2%,23.6%,18.8%和21%(p<0.001)。流式细胞仪检测表明条斑紫菜多糖可以阻滞肿瘤细胞的细胞周期于G0/G1期或G2/M期。
通过建立四氯化碳(CCl4)诱导的急性肝损伤小鼠模型,研究条斑紫菜多糖对四氯化碳(CCl4)诱导的急性肝损伤的保护作用。以0.2%CCl4橄榄油溶液经腹腔注射,制备小鼠急性肝损伤模型,测定给药后模型小鼠血清和肝匀浆的丙氨酸氨基转移酶(ALT),天冬氨酸转氨酶(AST),肝匀浆超氧化物岐化酶(SOD)以及丙二醛(MDA)含量,计算肝脏指数,并在光镜下观察肝组织病理学变化。实验结果显示,急性肝损伤模型组与正常对照组比较,各项指标均有显著差异(p<0.01):条斑紫菜多糖组与模型组比较,小鼠肝脏指数,血清ALT,AST和肝匀浆ALT,AST,MDA都明显降低(p<0.05),肝匀浆T-SOD活性升高(p<0.01),小鼠肝脏病理损伤状况明显改善。说明条斑紫菜多糖对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤有保护作用,其作用机制可能与抗脂质过氧化有关。