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目的:研究人龋病自然发展不同阶段的牙髓中感觉神经肽和抗原呈递细胞间的变化特点及二者的空间关系,即观察人龋病过程中牙髓降钙素基因相关肽(CGRP)、树突状细胞(HLA-DR)、P物质(SP)和血管内皮细胞之间的动态变化,以了解龋病过程中牙髓局部免疫系统如何参与牙髓的各种病理变化,为临床选择保存活髓时机及活髓药物提供理论基础和实验依据。 方法:采用免疫组化法观察临床上拔除的健康和龋病不同阶段的第三磨牙共34颗,将牙劈为颊舌两半,取新鲜牙髓。正常牙髓为对照组,龋病牙髓,以龋病临床诊断和牙体剖面龋坏深度为标准,分为浅、中、深3组。用CGRP、SP、HLA-DR、vWF四种单克隆或多克隆抗体分别标记牙髓中CGRP、SP、树突状细胞及血管内皮细胞,并对含CGRP、SP的神经纤维、细胞和血管进行了定性和定量观察。首次运用免疫组化双标技术同时标记人牙髓内CGRP和抗原呈递细胞HLA-DR,SP和血管内皮细胞,以期了解它们在炎症反应中的结构和功能关系。 结果: 1、正常与龋病牙髓中均有神经肽和抗原呈递细胞,多位于血管周围和造牙本质细胞层下。 2、龋病牙髓中神经肽CGRP数量随龋坏加深而增多,各组之间比较均有显著差异(P<0.05)。 3、龋病牙髓中神经肽SP数量亦随龋病进展而增多,中龋组明显增多(P<0.05);深龋时反而减少。 4、龋病牙髓中树突状细胞的数量随龋病进展而增多,中龋时显著增多,与其它各组比较均有显著差异(P<0.05)。各组均可见血管内皮细胞表达HLA-DR~+抗原。 5、龋病牙髓中阳性血管数目增多,管壁增厚,管腔扩大,中龋时增加显著(P<O.05)。 6、双标结果显示:龋病牙髓中神经肽CGRP与树突状细胞共聚集在龋坏相应的造牙本质细胞层下和血管周困,并可见神经肽CGRP接触或包饶树突状细胞:龋病牙髓中神经肽驴逐渐接近血管内皮细胞,在深龋时,神经肽与血管壁接触。结论: 1、正常牙髓「1…。经肽和抗原呈递细胞的分/卜,dW」这些物质随时抵御外来抗原的侵袭,从而保证才齿的健康。 2、牙髓组织中的frp经肽和抗原呈递细胞的数量与龋坏深度呈正相夫,龋坏早期,神经肽和树突状细胞对龋源性刺激做出了反应,随龋坏发展,局部免疫应答增强。 3、神经肽和抗原呈递细胞对龋源性刺激表现为共聚集,说明这些物质的局部相互作用加强,共同调节牙髓免疫反应。 4、牙髓中的神经肽和树突状细胞可对龋源性刺激做出相应的反应,因而在龋坏的早期阶段,从生物学角度入手,调动牙髓的自身防御潜能,可达到保存活髓的目的。