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奶牛乳房炎是导致奶牛业损失惨重的一种疾病,其一般可分为临床型乳房炎和隐性乳房炎。隐性乳房炎无明显症状,必须借助一定的检测方法才能诊断。该病可在牛群中广泛存在,国外隐性乳房炎的发病率为20%~50%,国内的发病率更高,在60%~80%间。隐性乳房炎可导致奶牛产奶量显著下降,乳房炎导致损失的70%可归咎于隐性乳房炎。因此,奶牛隐性乳房炎的防治具有重要的意义。本试验研究了奶牛隐性乳房炎的发病规律、病原菌分析及快速检测方法,主要研究结果如下: 1 通过对南京某奶牛场一年DHI的统计,分析了胎次、泌乳期和季节对体细胞数(SCC)和奶牛隐性乳房炎发病率的影响。结果表明:奶牛胎次对SCC和隐性乳房炎发病率影响明显,胎次增多,体细胞数和发病率都升高;泌乳期和季节对体细胞数与隐性乳房炎发病率影响不大 2 应用上海乳房炎检测法(SMT)和SCC检测了南京某奶牛场88头奶牛。以SCC作为隐性乳房炎判定基准,计算SMT检测结果与不同SCC诊断阈值检测结果的相符率。结果表明,以300000个/ml为SCC诊断阈值,SMT检测结果与SCC诊断结果的相符率最高,达46.88%。 3 从南京地区三个奶牛场采集104份隐性乳房炎乳样。经分离纯化,鉴定出93株细菌,葡萄球菌、链球菌、肠杆菌是主要致病菌。选取8株肠杆菌、10株链球菌和16株葡萄球菌进行了药敏试验、溶血性和细胞毒性试验。结果表明,三种主要细菌对多种抗生素产生了耐药性;除葡萄球菌溶血能力较强外,另两种细菌溶血能力弱或不溶血;所试验的菌株中,只有一株肠杆菌和两株葡萄球菌对Vero细胞有毒性外,9株细菌上清对Hep-2细胞有毒性。 4 建立了检测奶牛乳房炎致病菌金黄色葡萄球菌和无乳链球菌的双重PCR法。优化了双重PCR的反应条件,分析了PCR的特异性和灵敏性。利用水煮法制备模板,12株金黄色葡萄球菌临床分离株和10株无乳链球菌临床分离株,双重PCR均可扩增出目的条带。应用双重PCR和常规细菌鉴定法检测了54份隐性乳房炎奶样,双重PCR摘要检浏出金黄色葡萄球菌感染奶样12份,无乳链球菌感染扔样14份;常规细菌鉴定法检浏出金黄色葡萄球菌感染奶样13份,多乳链球菌感染奶样17份.