【摘 要】
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目的:针对褪黑素具有免疫调节及抗肿瘤两大作用,以IFN-γ及CXCL9,10/CXCR3分泌轴为靶点,探究褪黑素对胃癌IFN-γ及CXCL9,10/CXCR3分泌轴表达的影响及可能的免疫调节机制。进一步阐明褪黑素对胃癌的抑制作用及可能的免疫调节机制。方法:1.构建摘除松果体荷胃癌小鼠模型,雄性615小鼠随机分为七组,其中三组为摘除松果体组,三组为正常组,一组为假手术组。术后一周所有小鼠右上肢皮下植
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目的:针对褪黑素具有免疫调节及抗肿瘤两大作用,以IFN-γ及CXCL9,10/CXCR3分泌轴为靶点,探究褪黑素对胃癌IFN-γ及CXCL9,10/CXCR3分泌轴表达的影响及可能的免疫调节机制。进一步阐明褪黑素对胃癌的抑制作用及可能的免疫调节机制。方法:1.构建摘除松果体荷胃癌小鼠模型,雄性615小鼠随机分为七组,其中三组为摘除松果体组,三组为正常组,一组为假手术组。术后一周所有小鼠右上肢皮下植入MFC胃癌细胞构建荷胃癌模型,荷瘤一周后各组小鼠腹腔注射不同剂量的褪黑素干预,一周后取材。小鼠肿瘤和松果体组织HE染色观察及检测各组肿瘤的体积和脾、胸腺的重量变化;Western blot法检测小鼠肿瘤和脾IFN-γ及CXCL9,10/CXCR3表达变化;Real Time q PCR法检测小鼠肿瘤、脾和胸腺组织IFN-γ及CXCL9,10/CXCR3表达变化。2.构建不同浓度褪黑素干预胃癌细胞模型,Western blot和Real Time q PCR方法检测24、48、72小时胃癌细胞IFN-γ及CXCL9,10/CXCR3的表达。3.细胞转染CXCR3 si RNA,之后分别给予2或4 m M的褪黑素干预,CCK-8法检测褪黑素干预各组MFC胃癌细胞24、48、72小时后的增殖活性。结果:1.HE染色观察到瘤块的细胞具有明显异型性且血管增生明显,证实为胃癌移植瘤,另小鼠摘除组织为正常松果体组织。褪黑素干预后正常荷瘤及摘松果体荷瘤组小鼠肿瘤体积均明显减小。无论小鼠松果体摘除与否,外源性褪黑素干预后胃癌组织CXCL9,CXCL10及CXCR3表达均上调;摘除松果体荷瘤组给予50mg/kg褪黑素后,脾IFN-γ及CXCL9,10/CXCR3表达均上调,而在给予100mg/kg褪黑素后其表达有趋近于对照组的趋势;正常荷瘤组在给予50mg/kg褪黑素后,胸腺IFN-γ及CXCL9,10/CXCR3表达均下调,而在给予100mg/kg褪黑素后CXCL9,CXCL10及CXCR3表达均明显上调,摘除松果体荷瘤组褪黑素干预后IFN-γ及CXCL9,10/CXCR3表达均上调;各组免疫器官脾和胸腺的重量无明显差异。2.不同浓度褪黑素干预后胃癌细胞的IFN-γ及CXCL9,10/CXCR3表达均有不同程度的上调,未发现呈明显时间依赖性。3.细胞转染CXCR3 si RNA后结果显示:CXCR3-1较阴性对照组表达下调最显著;褪黑素干预组较阴性对照组细胞增殖活性明显降低;而转染组或转染+褪黑素组较相应对照组,细胞增殖活性无明显变化。结论:褪黑素可能通过调节IFN-γ及CXCL9,10/CXCR3分泌轴的途径,起到增强免疫从而抑制胃癌细胞增殖的作用。
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