研究背景:近年来,NAAA作为抗炎镇痛的靶标,在炎症,疼痛,癌症等各种疾病进程中的作用已有越来越多的探究和验证。通过抑制NAAA的作用,可以提高组织中PEA和OEA等脂肪酰基乙醇胺的含量,达到抗炎、镇痛以及神经保护等作用。现有的NAAA抑制剂大多是局部用药,且活性较差,半衰期短,不利于口服和整体动物实验,使用受到很大的限制,新型的NAAA抑制剂的研究已成为当务之急。目的:本课题组已合成结构稳定,活性强,毒副作用小的NAAA抑制剂F96,本研究通过一系列实验确定F96在脑部的抗炎作用,并试图寻找到药物的作用方式,探究其作用机理。方法:在课题组已合成F96的基础上,使用LPS造成短期急性和较长期的慢性脑部炎症。使用ELISA的方法测定主要炎症因子在血清和脑组织中的含量;使用Real-time PCR检测组织中相关炎症因子的表达以及NAAA,NAPE-PLD,PPAR-α等相关基因的表达量;使用Western Blot检测部分炎症因子的蛋白表达量以及小胶质细胞激活的标志性分子Iba-1的表达等;使用LC-MS连用的技术测定脂肪酸乙醇胺的变化量;使用苏木-伊红染色观察脑部损伤和细胞迁移;使用伊文思蓝测定对血脑屏障渗透率的影响;使用免疫荧光的方法观察小胶质细胞和星形胶质细胞的激活状况;使用基因组分类测序的方法测定肠道菌群的改变,反应其对脑部的影响;培养BV-2细胞,测定药物对其的影响。结果:F96在LPS造模1小时的模型中显著降低血清中TNF-α的表达;F96可降低c57/B6小鼠脑部炎症因子的基因表达;F96可恢复炎症小鼠脑部PEA的含量,部分升高OEA含量,但不影响其他内源性脂质;F96可抑制小胶质细胞和星形胶质细胞的激活;F96可纠正LPS造成的肠道菌群失调。结论:F96对LPS造成的急性和慢性脑部炎症均具有一定的治疗作用,可通过抑制小胶质细胞和星形胶质细胞的激活、抑制炎症因子从血浆透过血脑屏障向脑部转移而实现药物作用。