超声波辅助糖基化对β-Lg在体外模拟消化过程中致敏性的影响

来源 :南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wxsshj
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
食物过敏可引起免疫系统异常反应,当人体摄入食物过敏原后会引发皮肤、胃肠道和呼吸道等临床不良反应。牛乳是人们尤其是婴幼儿主要的营养来源,但也是八大主要过敏原之一,这主要是由于牛乳中存在β-乳球蛋白(β-Lactoglobulin,β-Lg)或其他乳蛋白,其中82%的牛乳过敏是由β-Lg引起的。目前,针对牛乳过敏仍然没有有效的治疗手段,避免过敏原的摄入是唯一且最有效的方法,但这样势必会造成营养的缺失。因此,亟待研发降低牛乳致敏的新技术。前期研究表明超声波辅助糖基化修饰可以大大降低β-Lg的致敏性。而超声波辅助糖基化修饰的β-Lg进入人体消化吸收后,其致敏性及过敏表位如何变化仍然不知。本论文以β-Lg为研究对象,采用超声波辅助糖基化修饰技术对其进行处理,以IgG结合能力为指标,利用响应面实验对超声波辅助糖基化降低β-Lg致敏性的条件进行优化;运用光谱学、质谱学等技术研究超声波辅助糖基化对β-Lg结构及糖基化位点的影响,揭示其降敏机制;通过体外模拟消化试验、ELISA试验、KU812细胞模型试验分析超声波辅助糖基化修饰的β-Lg在消化过程中消化特性、结构以及致敏性的变化规律;得出以下主要结论:(1)采用响应面实验对超声波辅助糖基化降低β-Lg致敏性的条件进行优化,并研究其结构的变化。得到超声波辅助糖基化降低β-Lg致敏性的最优条件:超声功率300 W,超声时间15 min,mβ-Lg:m乳糖为1:1。光谱学和质谱学的结果表明:超声波辅助糖基化显著改变了β-Lg的二级结构,使β-Lg的自由氨基、表面疏水性、内源荧光强度降低,最大发射波长(λmax)发生红移;超声预处理增加了β-Lg的糖基化位点,且糖基化肽段的DSP值显著提高;未经超声预处理的β-Lg有16个糖基化位点,超声处理后有19个糖基化位点。这表明,β-Lg致敏性的降低是由于糖基化位点掩盖了β-Lg的线性表位和破坏其构象表位所致。(2)采用间接竞争ELISA、扫描电镜、动态光散射和质谱等技术,研究超声波辅助糖基化修饰的β-Lg在消化过程中消化特性及其致敏性的变化。结果表明:超声波辅助糖基化修饰的β-Lg(β-Lg-Lac-300)在消化过程中致敏性显著降低,其胃肠消化的水解度也降低。在胃消化中形成了更大的颗粒结构,在肠消化中发生聚集;消化后其荧光强度先升高后降低,λmax出现红移;质谱分析表明,β-Lg-Lac-300经胃消化后糖基化位点减少了4个,经肠消化后没有变化;这些结果说明超声波辅助糖基化修饰可有效降低β-Lg在消化过程中的致敏性。(3)运用KU812细胞模型研究超声波辅助糖基化修饰β-Lg的消化产物对KU812细胞因子的影响。结果表明:随着消化过程的进行,β-Lg-Lac-300消化产物激发KU812细胞活化脱颗粒能力逐渐降低,免疫细胞因子的含量(如:组胺、TNF-α、IL-4、IL-6等)也依次降低,且始终低于天然β-Lg。因此,超声波辅助糖基化能显著降低β-Lg在消化过程中的致敏性,但消化产物仍具有一定的致敏性。
其他文献
红曲菌是一种药食两用的丝状真菌,其在发酵过程中可以产生色素、Mona colin K等多种次级代谢产物,它们具有抗癌、降脂、抑菌等功效。然而,红曲菌也会产生一种真菌毒素—桔霉素,其具有致畸、致癌、致突变的作用,从而限制了红曲菌更广泛的应用。探索一种安全可靠、操作简便的降低桔霉素方法,解决红曲菌产桔霉素的问题具有重要的实际意义。CRISPR/Cas9基因编辑技术能够进行精准定点的编辑,具有操作简便、
食源性晚期糖基化终末产物(AGEs)对人体的危害是不可忽视的。美拉德反应是AGEs形成的主要途径,但目前对抗坏血酸(Vc)参与的美拉德反应中AGEs形成机制的研究较少。本课题首次选取Vc,葡萄糖(Glu)和赖氨酸(Lys)为研究对象,采用建立模拟体系的方法研究热加工条件下影响AGEs产生的因素、其动力学及生成途径,揭示抗坏血酸参与的美拉德反应过程中AGEs的生成机理,具有重要的意义。本文主要研究内
乳液填充凝胶是一种包裹乳化液滴的半固态体系,在食品中可以模拟脂肪口感、携带油溶性活性营养物质。本论文以酶解大米淀粉为基质,制备酶解淀粉基乳液填充凝胶(Enzyme-modified starch based emulsion filled gel,ES-EFG)和携带了DHA藻油的酶解淀粉基乳液填充凝胶(DHA-emulsion filled gel,DHA-EFG),对它们的特性以及其在搅拌型酸
淀粉因其来源广泛,廉价易得而被广泛应用于食品和工业中。但天然淀粉固有的某些特性使其应用受到较大限制。因此众多淀粉改性方法被开发,以期通过改变淀粉物理化学性质而扩展其使用范围。将淀粉和亲水胶体类物质复配被认为是改善淀粉性质的一种绿色、安全、无污染的方法,目前已被广泛研究。并且直链淀粉的含量对淀粉的特性有显著影响,在淀粉-胶体复配体系中,直链淀粉含量对体系协同作用和交联作用的影响就更为显著。因此,本文
鄱阳湖是我国最大的淡水湖,由于血防工作的需要,每年对其湖泊浅滩使用170多吨氯硝柳胺(NCL)用于灭螺。随着NCL在鄱阳湖流域的大量反复使用,对水体环境产生影响。NCL作为一种疏水性有机物(HOCs),易吸附于土壤、底泥等固相介质中,在固相厌氧环境中难以被微生物利用降解,对周边生态系统的稳定产生威胁。鼠李糖脂作为目前应用最广泛的生物表面活性剂,可使固相介质中的HOCs转移到水相中,从而更好地被水体
和其他食物过敏相比,花生过敏症状严重,致死率高,是人类安全与健康的巨大威胁,也是主要的研究对象。花生中已被确认的过敏原蛋白有17种,Ara h 2因其强烈的致敏性和极高的过敏患者血清IgE识别率而被认为是花生中最主要的过敏原蛋白之一。烘焙作为一种常见的加工方式,会改变花生蛋白的高级结构,造成过敏原表位的破坏、暴露或生成,从而对花生蛋白的致敏性产生影响。本文以鲜花生和烘焙花生为研究对象,首先自制Ar
药食同源食材通过微生物发酵提升功效、降低副作用亟待研究。荷叶作为药食同源食材的降脂减肥研究已有大量报道,而利用乳酸菌等微生物资源发酵荷叶,改善其功能方面的研究甚少,特别是在肠球菌发酵荷叶改善脂肪细胞脂代谢和大鼠降脂机制方面,尚未见报道。为此,本文对两株益生性肠球菌(海氏肠球菌WEHI01和屎肠球菌WEFA23)发酵荷叶上清的功能进行了较为系统的研究,分析了肠球菌发酵荷叶上清的组分变化,及其在脂肪细
弋阳大禾谷是江西省弋阳县特产。其加工制成的弋阳年糕以柔韧爽滑著称,是中国国家地理标志产品。本研究以弋阳大禾谷及其淀粉为对象,探讨了结构与功能的关系,为确定大米在食品工业中的应用方向提供依据。同时,探究了机械加工过程中弋阳年糕的品质及淀粉水解特性的变化,为今后弋阳年糕及地方特色大米制品的加工工艺优化提供理论及数据参考。为了满足不同消费者需求,探究了添加可发酵碳水化合物对弋阳年糕品质和淀粉水解的影响,
芝麻乳和花生乳作为优质植物蛋白饮料,传统工艺加工时,需去渣以增加产品稳定性,导致膳食纤维、蛋白等营养物质损失严重。因此,研发免滤渣的全组分生产工艺对降低植物蛋白饮料的生产成本和提高其营养价值具有重要意义。本论文采用新型高压射流磨系统处理花生和芝麻,免除过滤步骤,并优化添加剂配方和白砂糖含量,制备稳定性好、口感佳的全组分芝麻乳和全组分花生乳,为高压射流磨系统制备全组分植物蛋白饮料提供参考。首先,开展
磁性纳米粒子(Magnetic nanoparticles,MNPs)是近些年固定化酶载体材料研究的热点之一。传统的共价固定化方法是将酶的氨基酸残基作为固定化位点与表面功能化修饰后的MNPs进行连接。这种方法在酶固定化位点选择上具有随机性,会在很大程度上增加固定化酶实验结果的不确定性,从而导致固定化效果难以把控。因此,非常有必要对定向固定化酶进行研究,开发出操作简单和可行性高的定向固定化方法。与游