rhIGF-Ⅰ的表达纯化和SARS-CoV未知蛋白细胞内定位及其功能研究

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胰岛素样生长因子-I(insulin-like growth factor-I,IGF-I)是一种具有促进多种细胞生长功能的活性多肽,它对组织细胞的增殖、分化、凋亡,机体的生长发育及肿瘤的发生发展起重要的调节作用。蛋白质纯化因其操作复杂,纯化条件不易掌握,产率低,阻碍了其产业化生产。所以建立一条相对简单、高效的纯化路线,有利于推动IGF-I研究和应用。 已构建好的含重组质粒pExSecI-IGF-I的E.coli BL21(DE3),经IPTG16℃低温诱导重组蛋白的表达。将离心收集到的菌体超声破壁,离心分离,收集上清液,进行离子交换层析和分子筛分离纯化。蛋白纯度用Tris-Tricine SDS-PAGE鉴定,Western blot检测纯化的重组蛋白的免疫学活性。目的蛋白以可溶形式存在胞浆中,经二步柱层析纯化后,可获得高纯度的rhIGF-I。Western blot分析表明分离纯化的蛋白具有免疫学活性。
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Isaacs在他创立的特征标稳定子极限理论中,引入了特征标三元组的诱导子和限制子的概念,证明了两个关键性的结果,一个是关于特征标三元组的拟本原性与本原性的关系问题,另一个是关于特征标三元组与其限制子二者的诱导子之间彼此相互确定的问题。 本文的主要目的是推广并加强Isaacs的上述两个结果,详言之,在第一个问题方面,我们首先证明了本原的特征标三元组均为拟本原的,这是本文的第一个主要结果:
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