基于整体柱和人工抗体的生物样品分离检测

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生物样品的分析中,通常需要检测复杂基质中的低丰度分析物。其实例是用于不同疾病的生物标记物,具有低治疗浓度的药物及其代谢物,或以低浓度存在于生物流体中的内源肽和蛋白质。在这些情况下,通常需要适当的样品制备以确保分析物的高浓度从而达到检测极限。  本论文设计分别合成了适用于生物分离分析的整体柱材料和人工抗体,针对血清样本中的葡萄糖以及心肌梗死的生物标志物肌钙蛋白Ⅰ,实现了更为高效和高选择性的分离检测。  本文的研究主要包括:(1)制备出可重复使用的pH响应性印迹整体柱,能实现对辣根过氧化物酶的选择性和特异性可逆结合。(2)通过在整体柱上共固定葡萄糖氧化酶和辣根过氧化物酶,构建酶促生物反应器,其表现出高操作稳定性和增强的生物催化效率。通过在18秒内检测真实人血样中的葡萄糖,证明了其优异的性能。(3)利用生物膜干涉技术筛选出对心肌梗死的标志物肌钙蛋白有高选择性和特异性结合的纳米粒子,其KD值能达到6.26×10-11,证明了它能替代天然抗体成为更廉价及有效的人工抗体。
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