[目的]运用免疫组化法,检测Pim-3蛋白在肺腺癌A549细胞系和不同中医辨证分型、组织类型肺癌组织中的表达,讨论其临床意义。[方法]1.标本搜集：搜集保存于湖北省十堰市太和医院病理科的肺癌组织、癌周组织及支气管扩张组织共27例术后石蜡包埋标本,肺癌、支气管扩张依据人民卫生出版社出版的《内科学》第七版教材的相关诊断标准确诊。按组织类型分组,其中非肺癌支气管肺组织(支气管扩张组织)6例,不同组织类型的肺癌组织共21例(包括腺癌、鳞癌、小细胞癌各7例),每例标本切片2张；并搜集体外培养的肺腺癌A549细胞。癌周组织取材于距离患者肿瘤病灶2-5cm的支气管肺组织。结合中医关于肺癌的相关辨证分型标准及患者临床症状特征,对21例肺癌病例进行中医辨证分型,其中包括气阴两虚型8例,阴虚内热型8例,痰浊壅肺型5例。2.实验分组：①按照细胞、组织类型分组：分为A549细胞组、支气管扩张组、肺腺癌组、肺鳞癌组、肺小细胞癌组、癌周组织组。②按照中医辨证分型：分为气阴两虚型、阴虚内热型、痰浊壅肺型。3.实验方法：各组实验标本,经脱蜡处理后运用免疫组化法染色,分别检测细胞内Pim-3蛋白的表达。Pim-3阳性表达为细胞胞浆内出现密集均匀黄染。由3名医师分别进行双盲阅片,对镜下阳性细胞百分率及染色强度进行评分。①阳性细胞百分率：每张切片随机选取5个高倍视野(×400),记数视野内阳性表达细胞数及总细胞数的百分率,阳性细胞数<5%为0分,5%-25%为1分,26%-50%为2分,51%-75%为3分,76%-100%为4分。②阳性着色强度：细胞胞浆无黄染为0分,淡黄色为1分,棕黄色为2分。③将两者分值相乘,并计算各组评分均值,小于1分为阴性(-),1-4分为弱阳性(+),5-8分为阳性(++)。各组间差异用方差分析(F检验)比较,spss17.0软件计算p值,分析A549细胞、不同组织类型及不同中医证型肺癌组织、支气管扩张组织、癌周组织之间Pim-3的表达差异。[结果]1.使用免疫组化染色后,在A549细胞中,A549细胞组为阳性表达,而A549细胞阴性对照组为阴性表达。两者Pim-3表达存在显著差异,p<0.05,其差异有统计学意义。说明Pim-3在肺腺癌A549细胞中呈阳性表达。2.6例支气管扩张术后标本,共12张切片进行免疫组化染色检测后,其中的肺泡上皮细胞、平滑肌细胞、血管内皮细胞及支气管柱状上皮细胞的Pim-3表达均为阴性。三者Pim-3表达无明显差异,p>0.05,三者间的差异无统计学意义。说明Pim-3在非肺癌支气管-肺组织中表达为阴性。3.在腺癌7例、鳞癌7例、小细胞癌7例标本,每组14张切片中,不同组织类型的癌组织细胞,Pim-3均为阳性表达,三组间Pim-3表达无明显差异,p值0.05,三者间的差异无统计学意义(表6)。说明Pim-3在不同组织类型肺癌都呈阳性表达,且相互间无明显的表达差异。而在癌周组织,Pim-3表达评分为0.33±0.58,呈阴性表达。4.在肺癌气阴两虚型8例、阴虚内热型8例、痰浊壅肺型5例标本,每组14张切片中,不同中医证型的癌组织细胞,Pim-3均为阳性表达,三组间Pim-3表达无明显差异,p值>0.05,三者间的差异无统计学意义。说明Pim-3在不同中医证型肺癌都呈阳性表达,且相互间无明显的表达差异。[结论]应用免疫组化技术检测后,Pim-3在A549细胞、肺癌组织中都呈阳性表达,而在癌周组织及非肺癌支气管-肺组织中不表达。Pim-3这种在肺癌组织中的特异性的高表达,可以将肺癌组织与癌周组织、非肺癌支气管肺组织区分开来。这提示了Pim-3蛋白可能是肺癌在发生发展过程中的特异性生物标志物,该标志物的检测,可能应用于肺癌的临床诊断。同时,在对不同组织类型及不同中医辨证分型的肺癌组织进行组间比较后,并未发现明显的统计学差异。因此,虽然Pim-3可能应用于肺癌的临床诊断,但并不能凭借检测结果区分肺癌的组织学类型。但是,本实验并未阐明Pim-3在肺癌发生发展过程中的具体作用及作用机制,后续可以对此进行进一步的深入研究,以探明其具体作用,明确其作为诊断肺癌的分子靶点的可行性,并探讨其作为肺癌治疗的分子靶点的可能性。