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目的:通过研究尊肾壮骨汤对假体周围骨溶解的抑制作用,通过检测肿瘤坏死因子—a(TNF—a)和形态学检查。从而判断骨尊肾壮汤是否对假体松动有预防和治疗作用。
方法:参照Allenm模型,选用成年新西兰家兔(雌雄不限)24只,体重2.5kg±0.2kg,随机分二组:对照组12只,实验组12只。对照组和实验组单下肢植入假体,术后2、4、6、8及10周向实验侧膝关节腔内注射聚乙烯微粒悬液1.5ml。实验组每日灌服尊肾壮骨汤,对照组每日灌服等量生理盐水。术后10周,双下肢拍X线片,了解假体周围骨溶解和假体松动情况。术后12周处死动物,暴露双膝关节及两侧股骨,观察假体有无松动。立即无菌条件下取假体周围组织,称重后,于玻璃研钵内将组织研磨成尽可能小,5000r/min离心10MIN,小心吸取上清液,ELISA检测TNF—a。之后取出实验动物双下肢股骨沿股骨纵轴取材并做不脱钙处理,甲基丙烯酸甲酯包埋,重质切片机切片,甲苯胺蓝染色,做形态学检查。
结果:
1.大体观察:对照组有6例假体周围由纤维样组织包裹,而实验组只有1例假体周围由纤维样组织包裹,其余假体紧贴骨组织或有一层新生骨组织包裹;对照组有两例假体完全没入股骨骨髓腔,实验组11只假体均位于股骨骨髓腔外。
2.术后双下肢X线片观察:实验组与对照组没有显著差异。
3.ELISA检测:实验组中家兔骨组织中的TNF—a的OD值较对照组中有显著性差异(P<0.001)。
4.光学显微镜下观察:实验组的假体隧道边缘为成熟的骨组织、少量致密的纤维结缔组织或有新生骨形成,其中未见明显的组织细胞反应。而对照组模拟假体隧道边缘产生一层纤维结缔组织界膜,其中含有大量的巨噬细胞和异物巨细胞。高倍显微镜下可见新鲜血管、肉芽组织增生、内皮细胞肿胀、间质水肿、淋巴细胞和巨嗜细胞浸润;5.骨组织形态学指标:骨小梁骨样组织体积、骨小梁破骨细胞吸收表面等的改变实验组和对照组比较有显著差异。
结论:尊肾壮骨汤防止假体周围骨溶解无论是从分子生物学方面还是骨组织形态学方面均证明作用确切,为指导临床用药提供了理论基础。