小麦白粉病是一种重要的叶部病害,它主要是通过产生白粉菌孢子影响植株光合作用,对小麦的品质和产量都产生了非常严重的影响,合理运用抗性品种是防治小麦白粉病最经济有效、安全环保的措施。在目前已正式命名的91个白粉病抗性基因中,来源于中间偃麦草的Pm40经过多年多点的抗性鉴定发现其对于白粉病的的抗性具有持久性和广谱性,其载体品系表现出了优良的农艺性状。本实验利用含有Pm40基因的抗病亲本品系L658和其姊妹系感病亲本L958杂交创制了3420个F₂代作图群体,并通过室内苗期和田间成株期的抗性鉴定以及F_2:3家系在室内和田间的性状分离情况,共同鉴定了群体中每个单株的表现型和基因型。再依据小麦7B染色体上已发布的SSR和EST序列设计的引物,利用亲本和F₂群体抗感混池筛选出了具有多态性且与Pm40基因相连锁的分子标记,构建了Pm40的精细遗传图谱,在该遗传图谱上分子标记的顺序依次为:BE423064、BM136081、BF478514、Xwmc335-7B、BF291338、BE446359、BF473824、Xgwm297-7B、Xwmc662-7B、Xwmc476-7B、Xwmc364-7B、Xgwm43-7B、BQ16814,遗传距离分别为:0.73c M、0.49cM、0.92cM、0.63cM、0.31cM、0.08cM、0.22cM、0.21cM、0.27cM、0.31cM、0.31cM、0.92cM、0.98cM。最终将Pm40基因定位在Xwmc335-7B和BF291338之间,遗传距离分别为0.63 cM和0.31cM。接着将遗传图谱上的EST分子标记序列与2017年发布的中国春小麦参考基因组的序列进行了对比,发现在前期定位的两个标记之间有164个不同的基因。然后对两个亲本在白粉菌侵染后的几个关键时间点进行RNA转录组测序,通过差异基因间的对比分析,最终筛选出4个符合要求的差异基因TraesCS7B01G164900、TraesCS7B01G138300、TraesCS7B01G125000、TraesCS7B01G191400,通过与小麦参考基因组序列进行对比发现,基因TraesCS7B01G191400更靠近前期定位区域,其作为Pm40候选基因的可能性最大。本研究将有助于丰富小麦白粉病的抗性遗传基础,加快抗白粉病新基因Pm40在抗病育种中的转移和利用。