食品中10种色素的高效液相色谱—质谱检测方法研究

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在市场商品中食用色素使用色系较多的是黄色色素,特别是人工合成色素日落黄和柠檬黄。人们分别针对允许使用的日落黄、柠檬黄两种黄色色素和碱性橙、酸性橙等违禁黄色色素研究较多,允许使用的合成色素常常存在超标准或超范围添加;不允许添加的非食用色素常被偷偷的违规添加。目前非食用色素的检测尚未有较为全面的国家标准,因此,在针对非食用色素的分析检测问题中有一定的漏洞。所以,开发一种更为简单有效的样品前处理方法,和建立一种能同时检测多种合成色素和工业染料的高效液相色谱-质谱检测方法更为迫切。在本课题中选取10种黄色色素,含1种天然色素(姜黄素),3种允许添加的合成色素(柠檬黄、日落黄、喹啉黄)和6种常见的非食用黄色色素(酸性间胺黄、碱性嫩黄O、碱性橙2、碱性橙21、碱性橙22、酸性橙Ⅱ),分别建立高效液相色谱检测方法进行定性定量检测,HPLC-MS/MS作为一个定性确证的步骤对10种色素进行质谱定性分析,以确保结果的准确性。本文主要研究内容如下:1、建立一种同时检测饮料、糖果、糕点食品中10种色素的高效液相色谱法。选取甲醇为提取溶剂对样品进行提取,通过对饮料、糖果、糕点三类样品的前处理优化,确立最佳前处理条件;选取德国Macherey-Nagel C18色谱柱(4.6×250 mm,5μm);进样量:20μL;柱温25℃;流速1.0 m L/min;检测波长:435 nm;流动相:甲醇(A)、0.02 mol/L乙酸铵溶液(B)、乙腈(C)为流动相梯度洗脱。在优化后的最佳色谱条件下,10种色素在0.25-160.0μg/m L范围内线性关系良好,相关系数达到0.994以上,定量限最低可达到0.125μg/m L,饮料样品加标回收率在88.2~110.8%之间,糖果样品加标回收率在85.8~109.9%之间,糕点样品加标回收率在85.1~109.2%之间。该方法重现性好,灵敏度和准确度高。2、建立一种HPLC-MS/MS方法定性分析10种色素,选用流动相:(0.1%甲酸+0.005 mol/L甲酸铵)水溶液:乙腈=70:30(V/V),正离子检测模式(ESI+),检测姜黄素、碱性嫩黄O、碱性橙2、碱性橙21、碱性橙22;选用流动相:(0.01 mol/L甲酸铵)水溶液:乙腈=70:30(V/V),负离子检测模式(ESI-),检测酸性间胺黄、柠檬黄、日落黄、喹啉黄、酸性橙Ⅱ。分别进行质谱定性分析检测。结果表明本方法适用于饮料、糖果和糕点食品种10色素的定性和定量检测分析,该方法具有前处理步骤简单、提取效果好,灵敏度高、检出限低和定量准确等优点。可为合成黄色色素的超范围超限量添加提供快速分析的方法,同时为非法添加非食用色素提供便捷、可靠的方法。
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