[目的]:探索肿瘤细胞来源的自噬小体DRibbles负载DCs作为DC疫苗的抗肿瘤效果,DC疫苗的功能与内质网应激(ERS)的相关机制研究。聚乙烯亚胺修饰的氢氧化铝纳米颗粒(LV@HPA/PEI)联合DRibbles后,探究其负载DCs后的抗原提呈能力变化及新型DC疫苗抗肿瘤疗效。[方法]:我们从肿瘤细胞系中提取了肿瘤自噬小体DRibbles,Western blot鉴定DRibbles的特异性标志LC3-Ⅱ和泛素化Ubiquitin的表达。将负载了不同浓度DRibbles的DCs作为疫苗免疫小鼠,流式细胞检测小鼠体内CD3+CD4+IFN-γ+和CD3+CD8+IFN-y+ T细胞比例的变化情况。通过Western blot检测DCs负载不同浓度DRibbles后的内质网应激(ERS)通路相关蛋白的变化。通过修饰方式获得LV@HPA/PEI,检测PEI修饰前后对抗原蛋白OVA吸附能力的变化。Western blot与流式检测通过LV@HPA/PEI纳米载体的作用,OVA抗原被DCs摄取的数量。DCs受LV@HPA/PEI刺激成熟的程度通过ELISA检测IL-12的分泌,并通过流式检测表面共刺激分子CD80和CD86的变化,氯酚红-β-D-半乳吡喃糖苷检测(CPRG实验)检测DCs抗原提呈功能的变化。DRibbles与LV@HPA/PEI联合负载DCs,作为DC疫苗免疫小鼠,流式检测其脾脏CD3+CD8+IFN-γ+ T细胞的比例变化。最后我们用LV@HPA/PEI-DRibbles负载DCs作为DC疫苗治疗荷瘤小鼠,观察其肿瘤生长与小鼠生存率的变化。[结果]:DRibbles在体外负载DCs后具有良好的生物相容性。我们将不同浓度的DRibble-DCs免疫小鼠,并取出其淋巴结与脾脏细胞,发现2.5 μg/mL的DRibbles负载DCs对肿瘤细胞的免疫杀伤作用最强。而高浓度的DRibbles佐剂功能的下降与DCs的ERS相关蛋白的变化有关。LV@HPA/PEI纳米颗粒相比于LV@HPA展现出更好的抗原运载能力与生物安全性,使OVA抗原更易于被DCs吞噬。另外,负载LV@HPA/PEI-OVA后可以促进DCs释放细胞因子IL-12,并增加DCs表面共刺激分子CD80和CD86的表达,标志着DCs被纳米材料活化成熟。肿瘤自噬抗原DRibbles联合LV@HPA/PEI负载DCs可以很好地激活肿瘤特异性CD3+CD8+IFN-γ+ T细胞比例的升高。在小鼠荷瘤实验中,LV@HPA/PEI-DRibble-DCs显著抑制了肿瘤的生长速率,延长了荷瘤小鼠的存活率。[结论]:这些结果证明了 DRibble-DCs具有很好的抗肿瘤免疫效果。DCs负载DRibbles后会影响其ERS通路的活化,调控ERS可以恢复DCs的功能。我们制备的LV@HPA/PEI-DRibble-DCs能够特异性抑制肿瘤的生长。