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第一部分1,25-二羟维生素D3预处理对在体小鼠心肌梗死心肌损伤的影响目的:1.探讨急性心肌梗死中心肌细胞自噬的变化情况。2.研究1,25-二羟维生素D3（1,25-dihydroxyvitamin D3,1,25VD3）对于急性心肌梗死（acute myocardium infarction,AMI）心肌的作用如何。方法:1.选取30只雄性C57/BL6J小鼠随机分为3组,每组10只。采用永久性结扎左前降支法构建AMI模型,对照组只穿线不结扎。1,25VD3预处理组（以下简称VD3组）按照每只150ng/kg/d皮下注射1周。2.采用酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay,EL ISA）检测心肌损伤标志物:肌酸激酶（creatine Kinase,CK）、肌酸激酶同工酶（creatine kinase isoenzyme,CKMB）、心肌肌钙蛋白I（cardiac troponin I,c Tn I）、脑利钠肽（brain natriuretic peptide,BNP）及炎性标志物:白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、肿瘤坏死因子-α（tumour necrosis factor-α,TNF-α）。3.术后24小时行心脏超声检查,测定左室舒张末期内径（left ventri cular end-diastolic dimension,LVEDD）、左心室收缩期末直径（left ve ntricular end systolic diameter,LVESD）、左室舒张末期前壁厚度（left ventricular anterior wall thickness at end‐diastolic,LVAWD）、射血分数（ejection fraction,EF）及左室短轴缩短率（Left ventricular short axis shortening rate,FS）。4.对巨噬细胞进行免疫组化染色了解心肌炎症浸润情况;采用TUN EL染色了解心肌凋亡情况;采用Western blotting检测促凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9（Caspas e-9）、Bax与抗凋亡蛋白Bcl-2以及自噬微管相关蛋白轻链3-II（Autoph agy microtubule-associated protein light chain 3-II,LC3-II）、Beclin-1、可溶性p62及非可溶性p62等心肌自噬标志物的变化情况。5.采用HE染色观察小鼠心肌组织形态学变化。采用透射电子显微镜观察小鼠心肌细胞自噬情况。结果:1.与对照组相比,AMI组小鼠LVEDD及LVESD显著升高,LVAW D、EF及FS显著降低,AMI小鼠出现心功能障碍;而VD3处理组上述指标改善明显。2.AMI组心肌损伤标记物CK、CKMB、c Tn I及BNP均明显升高,炎性标记物IL-6及TNF-α显著升高;VD3组上述指标较AMI组明显减少。AMI组心肌梗死面积最大,HE染色可见病理损伤,VD3组小鼠较之明显改善。3.与对照组相比,AMI组心肌细胞凋亡数量显著增加,促凋亡蛋白C aspase-3、Caspase-9及Bax显著上调,抗凋亡蛋白Bcl-2下调;VD3组上述趋势得以改善。4.AMI组小鼠LC3II和Beclin-1高于对照组,可溶性p62水平低于对照组;VD3组上述表达进一步增强。AMI组透色电镜下心肌细胞内可见自噬小体,VD3组自噬小体增多。小结:1.1,25VD3预处理可以减少AMI小鼠心肌梗死面积,减轻炎性细胞浸润,降低细胞凋亡,改善心功能。2.AMI组心肌自噬增强,VD3组进一步增强。第二部分1,25-二羟维生素D3对急性心肌梗死小鼠心肌细胞保护作用机制的研究目的:探讨1,25VD3增强自噬发挥心肌保护作用的可能作用机制,即其是否通过PI3K/AKT/m TOR通路参与了自噬。方法:首先构建在体小鼠AMI模型,分为对照组、AMI组及VD3组,每组10只。VD3组予1,25VD3以150ng/kg/d的剂量皮下注射一周。采用结扎左前降支方法构建AMI模型。采用实时定量聚合酶链反应（RT-q PCR）检测心肌PI3K、AKT及m TOR的m RNA表达,通过Western blotting法测PI3K/AKT/m TOR通路标记物,即p-PI3K、p-AKT及p-m TOR的表达情况。然后进一步在离体小鼠心肌细胞缺氧模型中验证。细胞分为缺氧组、VD3组及VD3联合3-MA组3组,其中VD3组1,25VD3浓度为1u M;V D3联合3-MA组中,予750ug/ml 3-MA及1,25VD3（1u M）联合处理。以p-PI3K、p-AKT及p-m TOR作为PI3K/AKT/m TOR通路标记物,选取自噬标志物LC3II、Beclin-1和p62来反映自噬的变化情况。采用Wester n blotting法测上述蛋白表达情况。结果:1.AMI组PI3K、AKT及m TOR在转录及蛋白表达水平均降低,VD3组上述表达进一步降低。2.缺氧组相比,VD3组LC3-II、Beclin-1升高,可溶性p62下降,1,25VD3增强自噬表达。3.VD3组p-PI3K、p-AKT及p-mTOR较缺氧组下降,表明VD3组可以抑制PI3K/AKT/m TOR通路表达。小结:1.PI3K/AKT/mTOR通路可以负向调节自噬。2.1,25VD3是通过负向调控PI3K/AKT/m TOR通路从而使心肌自噬得以增强的。综上,本课题研究结果表明1,25VD3可以减轻心肌损伤、减少心肌炎性细胞浸润及心肌细胞凋亡来改善急性心肌梗死的心脏功能。其对AM I的保护作用是通过负向调控PI3K/AKT/m TOR通路增强自噬实现的。第三部分急性心肌梗死患者血清25羟基维生素D的变化情况目的:探讨急性心肌梗死患者血清25羟基维生素D[25（OH）D]水平的变化情况及其临床意义。方法:选取我院心血管内科2019年10月至2020年10月收治的从发病到就诊时间<6小时急性心肌梗死患者共50例,同期健康体检者50例作为对照组。急性心肌梗死患者入院采血测血常规及C反应蛋白（CRP）,次晨空腹抽血测25（OH）D。健康体检者空腹血检测上述指标。急性心肌梗死患者进一步按照冠脉血管病变数目及Grace评分分组,比较各组间25（OH）D情况。结果:1.急性心肌梗死组患者血清25（OH）D水平较对照组明显降低;WBC及CRP水平较对照组明显升高。2.急性心肌梗死患者中,双支及多支血管病变患者血清25（OH）D水平较单支病变明显降低,但双支病变与单支病变相比未见差异;高危与低危组患者相比,血清25（OH）D水平明显降低,但低危与中危、中危与高危组相比均未见差异。小结:在急性心肌梗死患者中测定血清25（OH）D水平可以帮助早期进行确诊,并进一步在诊断的危险分层方面提供一定程度的依据,值得临床广泛推广。