香蕉作为一种重要的水果,同时也是重要的粮食作物,其果肉中的抗性淀粉含量要高于其他水果和常规的农作物。香蕉中的抗性淀粉具有调节消化道、血液胆固醇水平、微生物菌群和血糖等保健功效。青香蕉的果肉中抗性淀粉极高,可达到干重的15%以上。香蕉中,抗性淀粉含量与直链淀粉含量呈正相关。淀粉分支酶（SBE）在决定淀粉中直链/支链淀粉比例的过程中起着关键的作用。本文从发育果实中持续高表达的淀粉分支酶基因Ma SBE4入手,探究香蕉果实发育阶段抗性淀粉积累的分子生物学调控机制。以Ma SBE4的启动子为诱饵,通过酵母单杂交筛库实验,筛选到了一批能够与启动子互作的蛋白质。通过聚类分析和保守结构域分析,从中筛选出了5个假定的转录因子蛋白,分别是Ma C3H24、Ma HOX32、Ma SPL15、Ma EID1和Ma MBD13。其DNA结合能力通过点对点的酵母单杂交实验得到了验证。亚细胞定位实验结果表明,当在水稻及香蕉原生质体中转入Ma C3H24、Ma HOX32、Ma SPL15和Ma MBD13时,能够在细胞核中观察到绿色荧光。该结果证明上述3个蛋白质为核定位蛋白,符合转录因子的基本特征。为验证Ma C3H24、Ma HOX32、Ma SPL15和Ma MBD13的转录调控能力,本研究采用了双荧光素酶报告系统。通过在水稻原生质体中共转带有Ma SBE4启动子的报告载体和各转录因子蛋白,我们发现Ma C3H24通过与Ma SBE4启动子结合,激活了下游萤火虫荧光素酶基因的表达,使报告基因的表达量上调至对照的3倍;相反的,Ma SPL15和Ma MBD13与启动子结合后,使报告基因显著下调,与对照相比分别下调45.2%和38.4%。同样,在酵母中的转录因子激活能力验证显示,转入Ma C3H24-GAL4 BD融合蛋白的酵母能够在含有X-α-gal的SD/-Trp平板上显蓝色,表现出转录激活功能。一系列实验结果表明,Ma C3H24、Ma SPL15和Ma MBD13为调控香蕉Ma SBE4基因表达的转录因子,其中Ma SPL15和Ma MBD13具有转录抑制的特性。为进一步探究转录因子的调控对抗性淀粉积累和其他的性状的影响,本研究还通过农杆菌侵染香蕉胚性悬浮细胞（ECS）的方法构建了Ma C3H24、Ma SPL15和Ma MBD13的过表达株系。