烟草青枯病拮抗放线菌的分离鉴定及其生防效果的研究

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烟草青枯病是一种由茄科劳尔氏菌(R.Solanacearum)引起的细菌性土传病害,其广泛分布于全国各烟区,已成为危害烟草生产的主要病害之一。本试验从植烟土壤中分离筛选出一株高效拮抗烟草青枯菌的放线菌,对其进行了初步鉴定和发酵条件优化,并通过温室盆栽试验对拮抗放线菌的生防效果进行验证,其结果分述如下:(1)以烟草青枯菌为指示菌,从贵州省福泉市植烟土壤中分离筛选出一株对烟草青枯菌有高效拮抗作用的菌株A27,其拮抗烟草青枯菌的抑菌圈直径达到42.6cm。(2)菌株A27基内菌丝无横隔,气生菌丝少分支,孢子丝直、柔曲,孢子椭圆形。根据菌株A27的培养特征、生理生化特性和16SrRNA基因序列分析,将其初步鉴定为链霉菌属放线菌。(3)通过对菌株A27发酵条件的研究发现:其最佳碳源为可溶性淀粉,最佳氮源为大豆蛋白胨;正交试验结果显示其最适培养基成分为:可溶性淀粉2%,大豆蛋白胨0.3%,氯化钠0.075%和硫酸镁0.025%。最适发酵条件为:pH 6-8;培养温度28 ℃;装液量80mL/250mL;接种量6%;摇床转速170r/min;发酵时间120h。(4)通过温室盆栽试验验证菌株A27的生防效果,结果表明,接种菌株A27可以有效防控烟草青枯病的发生,使用A27发酵的生物有机肥(BOF)、A27菌液灌根(G27)、A27菌液加液体氨基酸肥灌根(G27+AA)、A27菌液蘸根(Z27)和A27菌悬液加15%淀粉蘸根(Z27+D)的防治效果均达到52.8%以上,其中处理Z27和Z27+D的防治效果分别达到60.4%和64.2%。另外,在60d试验结束后,处理BOF、G27、G27+AA、Z27和Z27+D的根际土壤中菌株A27数量均大于105CFU/g 土,说明菌株A27在烟草根际具有较好的定殖能力,其中Z27+D处理的A27菌数最高为1.66× 1 06 CFU/g 土,说明淀粉菌悬液蘸根的处理能提高拮抗菌在作物根际的定殖效果。(5)烟草叶片抗病性相关酶(物质)活性(含量)的测定结果表明,与对照相比,各处理能显著提高烟草抗性相关的POD、CAT和SOD酶活,并降低烟草组织中MDA的含量。说明菌株A27能诱导烟草植株产生系统抗性。
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