针刺对未成熟鼠缺氧缺血性脑损害脑发育及髓鞘形成的影响

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[目的]脑室周围白质软化(periventricular leukomalacia,PVL)是围产期新生儿一种较常见的脑损伤形式,其发生主要与早产、缺氧缺血、感染、高胆红素血症、机械通气等因素有关。针刺治疗作为我国传统医学的重要组成部分,其对脑血管病的治疗作用已逐渐被广泛肯定。本研究在成功构建缺氧缺血未成熟鼠脑室周围白质软化模型的基础上,探讨针刺疗法对缺氧缺血未成熟鼠脑发育及髓鞘形成的影响。[方法]随机选取15只孕鼠,分为实验组(n=10)和对照组(n=5),孕21天时用乙醚吸入麻醉后剖腹,对照组孕鼠剖腹后打开子宫取出胎鼠,随机获胎鼠40只为空白对照组(A组)。实验组孕鼠剖腹后取出子宫,置于37℃水浴中15min后行延迟性剖宫产取出胎鼠,随机获取胎鼠80只并分为模型组(B组)40只和模型+针刺组(C组)40只。喂养7天后对C组大鼠进行针刺治疗,每天一次,连续21天。而A组和B组不做针刺处理,置于相同环境中喂养。各组按照1,2,3,7,28天5个时间点进行观察,包括体重,脑重,神经行为学的测量,同时进行病理学及细胞凋亡和少突胶质细胞04双标记检测。[结果]1.生长发育情况:A组生长发育正常,B、C组存活后出现生长发育迟缓,A组体重明显高于B、C组,差异有统计学意义(P<0.05).生后28天,三组体重快速增长,A组明显高于B、C组,而C组体重明显高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。生后前三天三组大鼠脑重变化不大,三组比较差异无统计学意义(P>0.05),生后7天A组脑重高于B、C组,有显著性差异(P<0.05),生后28天,A组脑重高于B、C组,C组脑重高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。2.生后28天神经行为学检测:A组悬吊试验、斜坡试验及旷场试验明显高于B、C组,C组明显高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。3.病理学检测:HE染色:A组侧脑室周围白质细胞排列有序,B、C组脑室周围白质细胞排列紊乱,白质疏松,部分呈筛网状坏死,后期有不同程度细胞增生,脑室扩大。治疗后C组排列紊乱有所改善,坏死灶缩小。髓鞘染色:A组髓鞘染色排列有序,厚度均匀,B及治疗前C组髓鞘稀疏变薄,治疗后C组髓鞘稀疏改善。4.细胞凋亡和少突胶质细胞04双标记检测:生后1天B、C组就出现凋亡细胞数增多,2天达高峰,以标记O4阳性的少突胶质细胞前体为主,两组间差异无统计学意义(P>0.05),A组凋亡细胞数少见,与B、C组比较有显著性差异(P<0.05);7天后B、C组凋亡细胞数减少,但仍较A组多,差异有统计学意义(P<0.05);28天三组凋亡细胞数无明显差异(P>0.05).[结论]水浴法延迟剖宫产术构建PVL模型是可行的。针刺治疗对缺氧缺血未成熟鼠的脑发育和髓鞘形成具有明显的促进作用,可以作为缺氧缺血性脑损伤治疗的措施。
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