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禽流感病毒(avian influenza virus，AIV)是甲型流感病毒，由16个HA亚型(H1～H16)和9个NA亚型(N1～N9)组成。过去十年间，H5亚型高致病性AIV在多个国家曾造成重大的经济损失。大多数AIV仅感染鸟类，但有时也可感染人和其他哺乳动物。AIV对人类健康是个挑战。2013年3月，在中国首次发现的H7N9亚型AIV已经引起超过430人感染，其中150人死亡。因此，控制AIV的感染对经济和公共卫生具有重大意义。 AIV监测是做好防控的基本工作，主要依赖于采集的口咽、泄殖腔拭子样品或粪便样品的检测。当采集的样品不能及时进行检测时，适当的样品运输和保存十分重要。但是，关于样品运输和保存相关的实验数据有限。一些国际和国内的标准方法和文章介绍，磷酸盐缓冲液(phosphatebuffered saline，PBS)和脑心浸出液肉汤（brain heart influsion broth,BHIB）常用于运输和保存收集的禽流感检测样品。Spackman E等人已发现在保存禽流感拭子样品时，样品保存液BHIB比PBS效果好。在AIV检测时，世界卫生组织(WHO)推荐PBS-甘油作为样品保存液。目前，BHIB和PBS-甘油的比较未见报道，特别是样品在保存一段时间后进行检测。 在本研究中，使用PBS-甘油、PBS和BHIB三种样品保存液运输和保存AIV模拟和实际样品，采用病毒分离和RT-PCR检测方法比较三者的优良。模拟样品经三种样品保存液分别置于4℃和-20℃保存一周（-20℃保存期间冻融两次），上清液接种鸡胚，收集尿囊液进行血凝试验，观察鸡胚感染情况。2014年7月份，在青岛市随机选择5个活禽交易市场，采集拭子样品275份，粪便样品300份，分别使用三种样品保存液进行保存。拭子样品:-20℃保存24h，冻融一次后进行病毒扩增;而后继续置于-20℃保存一周，冻融两次直接提取核酸，均采用RT-PCR方法进行检测。粪便样品:样品直接进行病毒扩增;样品置于4℃保存72h后，进行病毒扩增;样品置于-20℃保存一周，冻融一次后进行病毒扩增。收集死胚和血凝阳性活胚尿囊液，提取核酸，采用RT-PCR方法进行检测，比较阳性检出率。 对不同的样品在-20℃保存不同时间进行了四次检测。经过四次检测结果表明，样品保存液PBS-甘油比PBS和BHIB效果好，PBS没有BHIB效果好。四次检测中有两次检测显示，BHIB比PBS效果好。不同样品在4℃保存不同时间进行的两次检测，两组结果都显示，样品保存液PBS-甘油和PBS比BHIB效果好，PBS-甘油和PBS之间没有显著差异。因此，该研究表明，当样品在4℃保存时，PBS比BHIB效果好，但是如果样品在-20℃保存，PBS比BHIB效果差，样品不论是在4℃还是-20℃保存，都是PBS-甘油效果最好。此外，样品不管是在PBS-甘油，PBS或BHIB样品保存液中保存，还是在-20℃或4℃保存一段时间后，样品中的病毒浓度都会明显降低。因此，收集AIV样品应尽快进行检测。本研究有助于国际和国家标准方法的更新，也可广泛应用在实验室和临床操作中。