背景:肝细胞肝癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）是一种常见的恶性肿瘤,在全球范围内发病率位居第五,肿瘤相关死亡率居第三。临床上仅有10%-20%的肝癌能通过外科手术完全切除,术后5年复发率超过70%。目前,缺乏有效的靶点仍是肝癌治疗难点。EAG1（Kv10.1,KCNH1,Ether-a-go-go-1）是一种电压门控钾通道,已证实在宫颈癌、肺癌、乳腺癌、结肠癌、前列腺癌和肝癌中高表达,EAG1表达与多种肿瘤的临床预后密切相关。深入研究EAG1在肝癌中的表达与肝癌预后的关系,阐明EAG1调控肝癌增殖和迁移侵袭的相关分子机制,有望为肝癌的防治提供新的理论依据,具有重要的科学意义和临床价值。目的:本研究拟在肝癌患者肝癌组织及其配对的癌旁组织中比较EAG1的表达差异,了解EAG1表达差异是否与肝癌的不良预后相关。通过进一步的体内和体外研究阐明EAG1对肝癌增殖和迁移侵袭能力的调节作用,并深入研究其分子机制。探索EAG1抑制剂在肝癌治疗中是否发挥作用。为肝癌的防治提供新的理论依据和治疗方法。方法:1.收集233对肝癌患者肿瘤及配对癌旁组织,分别使用RT-qPCR、Western Blot、免疫组化技术研究EAG1在肝癌组织与癌旁组织的表达差异,并分析EAG1的表达强度与肝癌患者临床指标、临床预后是否相关。2.使用LM3和Huh7细胞系,构建EAG1稳定沉默或过表达的细胞,通过体内及体外实验研究EAG1对肝癌增殖能力的影响。通过周期分析、转录组组织芯片筛选、信号通路蛋白验证,研究EAG1可以通过调控细胞周期影响肝癌细胞增殖,并寻找下游关键分子。进一步通过功能补救实验研究EAG1与下游调控分子的相互作用关系及调节方式。3.通过体内外实验研究EAG1对肝癌迁移、侵袭能力的影响,并研究是否是因为细胞结构功能变化导致迁移、侵袭能力的改变。4.联合使用EAG1的抑制剂和肝癌化疗药物,探索EAG1肝癌治疗中的意义。结果:1.在肝癌患者肿瘤组织中EAG1较癌旁组织高表达,并且EAG1的高表达和肝癌患者的不良预后相关。2.体外及体内实验均证明EAG1能促进肝癌细胞增殖。周期分析、转录组基因芯片信号通路富集分析发现EAG1异常表达能影响细胞周期,周期信号通路相关蛋白表达差异验证了这一结果,并发现下游调控分子SKP2。SKP2功能补救及药物抑制证明EAG1通过调控SKP2影响细胞增殖。进一步研究发现EAG1是通过抑制SKP2的泛素化降解促进SKP2蛋白含量升高。3.体外及体内实验证明EAG1可以促进肝癌细胞的迁移及侵袭能力,并且EAG1是通过促进肝癌细胞形成细胞伪足促进肝癌迁移、侵袭。4.使用EAG1的抑制剂（阿司咪唑）可以增强阿霉素对肝癌细胞的杀伤作用。结论:EAG1在肝癌组织中高表达,并且和肝癌患者的不良预后相关;EAG1可以通过抑制SKP2的泛素化降解而促进细胞周期进展,进而促进肝癌的增殖;EAG1可以通过促进细胞伪足形成促进肝癌细胞的迁移侵袭能力;阿司咪唑（一种EAG1的抑制剂）可以促进阿霉素对肝癌的抗肿瘤作用（概述图1-1）。以上研究表明EAG1在肝癌的发生发展中发挥重要作用,并且提供了一种肝癌的潜在治疗方法。