研究目的：通过测量不同浓度氟离子环境中成釉细胞成釉相关蛋白酶和转化生长因子β1(TGF-β1)的表达,对比各蛋白随氟离子浓度变化的趋势,并进一步调节TGF-β1通路,观察成釉细胞的功能活性,推断氟能否通过TGF-β1介导的通路影响成釉细胞,为氟牙症的机制研究和治疗提供依据。研究方法：在不同氟离子浓度下培养分泌期成釉细胞系(LS8),测量作用不同时间后LS8的增殖活性,筛选出最佳的作用浓度；在最佳作用浓度下培养24小时后,测量LS8成釉质相关蛋白酶金属基质蛋白酶20(MMP20)、激肽缓释酶4(KLK4)以及TGF-β1的表达；进一步调节TGF-β1通路,观察LS8中MMP20的表达变化,最后,运用SPSS17.0软件对所得数据进行统计学分析。实验结果：1、短时间(12小时)内,不同浓度氟离子对LS8的增殖活性影响没有明显统计学差异,随着作用时间延长,各浓度氟离子对LS8发生不同影响,且作用时间越长,LS8增殖活性越低。2、在作用时间24小时,低浓度氟离子(<1.0mM)环境中,LS8增殖活性增强,且在0.25mM时最强；高浓度氟离子(>1.0mM)环境中,LS8增殖活性减弱；1.0mM氟离子对LS8增殖活性无明显影响。3、在作用时间24小时,低浓度氟离子(0.25mM)环境中,MMP20.KLK4及TGF-β1的表达增强；高浓度氟离子(2.0mM)环境中,MMP20.KLK4及TGF-β1的表达减低；且三者的变化趋势基本一致。4、外源性TGF-β1可以促进MMP20表达,且TGF-β1浓度越高,MMP20表达量越高。5、外源性TGF-β1联合高浓度氟离子处理组的MMP20表达量高于单纯高氟处理组。6.TGF-β1受体阻滞剂LY2157299抑制MMP20表达,且与TGF-β1联合使用,MMP20表达量低于单纯TGF-β1处理组。实验结论：氟离子作为致病因素,能够通过影响分泌期成釉细胞的增殖活性,直接影响成釉过程；也可以通过抑制釉基质蛋白酶MMP20的表达,间接抑制成釉过程；氟离子可能通过调节TGF-β1通路,介导对成釉过程的影响。低剂量,短时长的氟离子作用可以防治龋齿,增强成釉细胞功能活性,反之,会抑制釉质发育,导致氟斑牙的发生。合理使用氟元素,对于降低患龋率,提高全民口腔健康有着重要意义。而TGF-β1在对抗氟损害时的表现,可以作为一个手段,辅助防治氟牙症。