【摘 要】
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目的 建立定量检测食品中香菇成分的荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法,以辨别出口商品和国内市场中谎报香菇成分含量、以次充好的菌菇产品.方法 选取香菇基因组单拷贝核基因Hydrophobin Protein设计香菇种属特异性引物,扩增107 bp的片段,用于荧光PCR定量检测.分别以3种香菇作为阳性对照和14种非香菇菌种、植物产品作为阴性对照,测试实时荧光PCR引物和探针的特异性.以香菇标准DNA进行8个浓度梯度稀释,测试的方法绝对定量限,并制备12个梯度含量
【机 构】
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青岛海关技术中心, 青岛 266000;黄岛海关, 青岛 266400;江南大学食品学院, 无锡 214000
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目的 建立定量检测食品中香菇成分的荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法,以辨别出口商品和国内市场中谎报香菇成分含量、以次充好的菌菇产品.方法 选取香菇基因组单拷贝核基因Hydrophobin Protein设计香菇种属特异性引物,扩增107 bp的片段,用于荧光PCR定量检测.分别以3种香菇作为阳性对照和14种非香菇菌种、植物产品作为阴性对照,测试实时荧光PCR引物和探针的特异性.以香菇标准DNA进行8个浓度梯度稀释,测试的方法绝对定量限,并制备12个梯度含量的香菇DNA样品,测试香菇相对含量的标准曲线.结果 本研究建立的香菇荧光PCR定量检测方法对香菇物种的特异性好,与其他食品物种无交叉结果,荧光PCR扩增效率为0.90,绝对定量限(limit of quantitation,LOQ)为0.01 pg/μL,含量检测LOQ为0.05％.结论 本方法重复性和实用性好,可以满足食品和调味料中香菇含量定量检测要求.
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