p185胞外区基因表达载体的构建

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目的获得p185胞外区基因并与载体相连接,构建重组质粒。方法从过度表达p185的NIH3T3-erbB2细胞中提取总RNA,以特异性引物逆转录合成cDNA,再通过PCR扩增出目的基因片断,经酶切后与质粒载体组成重组质粒。用此重组质粒转化大肠杆菌XL1-Blue,在含氨苄青霉素的LB培养基上培养,挑取阳性克隆并鉴定。结果得到了带有p185胞外区基因的重组质粒。结论通过逆转录PCR扩增和基因重组到载体pQE40而成功地得到p185胞外区基因表达载体。
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