【摘 要】
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为保障转基因大豆的可追溯性以及消费者的知情权和选择权,开发快速、灵敏、准确的转基因大豆检测方法显得尤为重要.文章建立了一种用于检测转基因大豆及其制品的可视化跨越式
【机 构】
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河北农业大学食品科技学院,河北保定071001;河北农业大学理工学院,河北沧州061100;河北农业大学生命科学学院,河北保定071001
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为保障转基因大豆的可追溯性以及消费者的知情权和选择权,开发快速、灵敏、准确的转基因大豆检测方法显得尤为重要.文章建立了一种用于检测转基因大豆及其制品的可视化跨越式滚环等温扩增(Saltatory rolling circle amplification,SRCA)技术.根据抗除草剂草甘膦CP4-EPSPS基因设计引物,进行特异性验证,并对该方法的灵敏度和检出限进行研究.通过检测68份实际样品,对该方法的相对敏感度、相对特异性和相对符合率进行评价.结果表明:可视化SRCA方法具有良好的特异性,其检测转基因大豆的灵敏度为8.8×100 fg/μL,是SRCA凝胶电泳法的10倍,是PCR方法的1000倍.在人工加标样品中,可视化SRCA方法的检出限为0.01％(w/w),均显著低于SRCA凝胶电泳法和PCR方法.与行业检测标准(SN/T 1204-2016)相比,可视化SRCA方法的相对敏感性、相对特异性和相对符合率分别为100.00％、98.41％、98.52％.可视化SRCA方法具有操作简便、灵敏度高、特异性强、检出限低等优点,可以灵敏、高效地检测转基因成分,有利于在检测机构的推广应用.
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