【摘 要】
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目的 探讨自噬及自噬相关蛋白5（ATG5）和ATG7在神经干细胞（NSC）体外扩增中的作用。方法 从SD胚胎大鼠脑组织中分离出NSC在体外进行培养，在NSC体外扩增过程中，测量神经球直径大小变化，并用CCK-8试剂盒检测细胞增殖率，通过Western印迹检测ATG5、ATG7、LC3及PCNA的蛋白表达水平，利用透射电子显微镜（TEM）观察自噬泡形成情况，用免疫荧光分析LC3及Ki67的表达，以及
【机 构】
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军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室国家蛋白质科学中心(北京)
【基金项目】
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国家自然科学基金（81730055;81971781;31771321）；
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目的 探讨自噬及自噬相关蛋白5（ATG5）和ATG7在神经干细胞（NSC）体外扩增中的作用。方法 从SD胚胎大鼠脑组织中分离出NSC在体外进行培养，在NSC体外扩增过程中，测量神经球直径大小变化，并用CCK-8试剂盒检测细胞增殖率，通过Western印迹检测ATG5、ATG7、LC3及PCNA的蛋白表达水平，利用透射电子显微镜（TEM）观察自噬泡形成情况，用免疫荧光分析LC3及Ki67的表达，以及用EdU掺入法检测细胞增殖能力。进一步经过自噬抑制剂Baf A1干预处理，或用siRNA敲低Atg5/Atg7表达后评价自噬及自噬蛋白ATG5/ATG7在NSC体外扩增中的作用。结果 自噬活性及增殖能力在NSC体外扩增过程中逐渐增强；用Baf A1抑制自噬后NSCs的增殖受到明显抑制，表明自噬活性增加能促进NSC增殖。此外，与对照组相比，敲低Atg5或Atg7后，NSC的自噬活性和增殖能力均明显下降。结论 自噬能促进NSC在体外扩增中的增殖能力，在这一过程中ATG5和ATG7对于维持NSC自噬活性是必不可少的。
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