观察体外糖尿病环境如高糖、高游离脂肪酸(FFA)和低氧刺激对人脑血管内皮细胞(HBVEC)人类细胞分裂周期蛋白14A(Hcdc14A)和相关周期蛋白表达及细胞增殖、凋亡的影响，进而探讨糖尿病诱发脑血管内皮细胞损伤的新机制。
方法分别采用不同条件的高糖、FFA和低氧刺激HBVEC，RT-PCR检测Hcdc14A的mRNA表达，Western印迹法检测Hcdc14A及相关周期蛋白周期素B、周期素D、周期素E和p53的蛋白表达，XXT法检测细胞增殖率，流式细胞仪测定细胞凋亡率。
结果不同浓度葡萄糖(10、15和25 mmol/L)和FFA(50、100及200 μmol/L)分别孵育HBVEC 72 h，或以25 mmol/L葡萄糖、200 μmol/L FFA分别刺激24、48和72 h，均呈剂量和时间依赖性地降低Hcdc14A的mRNA和蛋白表达(均P<0.05)，同时下调周期素B、周期素D和周期素E的蛋白表达(均P<0.05)，上调p53蛋白表达(均P<0.05)，低氧刺激也显示相似结果。联合刺激(葡萄糖25 mmol/L＋FFA 200 μmol/L)48 h后，再进行低氧刺激24 h后，与正常对照组、高糖组、高FFA组及低氧组相比，高糖＋高FFA＋低氧联合刺激组显著下调HBVEC的Hcdc14A mRNA和蛋白表达(均P<0.05)，同时下调周期素B、周期素D和周期素E的蛋白水平(均P<0.05)，并上调p53蛋白水平(均P<0.05)。与正常对照组、高糖组、高FFA组及低氧组相比，高糖＋高FFA＋低氧联合刺激组抑制HBVEC增殖的作用最为明显(40.7%±12.1%对100.0%±10.2%、67.5%±12.1%、55.3%±11.2%和64.4%±11.3%，均P<0.05)，并使细胞凋亡率明显增加(22.5%±1.77%对5.7%±0.83%、9.3%±0.95%、16.3%±1.69%和16.3%±1.15%，均P<0.05)。
结论细胞周期调控蛋白Hcdc14A可能在糖尿病诱发脑血管内皮细胞损伤中起重要作用，可能是参与细胞损伤的主要信号通路。