【摘 要】
：
分析携TRAIL和HN基因的重组腺病毒在DT40细胞中的表达规律及杀伤肿瘤细胞的生物学效应。通过RT-PCR分别从鸡外周血淋巴细胞和新城疫病毒(NDV)LaSota株中扩增出TRAIL和HN基因,
【基金项目】
：
国家自然基金项目(31072109);天津市高等学校科技发展基金(20060720);天津市自然科学基金重点项目(12JCZDJC28304)
论文部分内容阅读
分析携TRAIL和HN基因的重组腺病毒在DT40细胞中的表达规律及杀伤肿瘤细胞的生物学效应。通过RT-PCR分别从鸡外周血淋巴细胞和新城疫病毒(NDV)LaSota株中扩增出TRAIL和HN基因,通过定点突变和重叠延伸拼接法实现TRAIL和HN基因的2A连接,将获得的目的基因克隆到pShuttle-CMV穿梭载体中,与pAdeasy-1载体在BJ5183细菌内同源重组,构建了包含目的基因的重组腺病毒质粒pAd-TRAIL和pAd-TRAIL-2A-HN,将质粒线性化后转染AD293细胞,包装后的重组腺病毒,经RT-PCR检测、荧光显微镜观察和病毒滴度测定后,将获得的重组腺病毒体外转染禽淋巴白血病DT40细胞,通过RT-PCR和Western blotting检测重组腺病毒的感染性和外源基因的表达情况,采用流式细胞仪检测重组腺病毒对DT40细胞生长的影响以及Ad-TRAIL和Ad-TRAIL-2A-HN对DT40细胞的凋亡作用。PacⅠ酶切证实同源重组成功;RT-PCR、荧光显微镜检测证实重组腺病毒质粒成功导入AD293细胞中且具有良好的感染性,滴度为1.9×1010PFU/mL;Western blot检测结果显示,TRAIL-linker-HN基因能够在DT40细胞中稳定表达并对DT40细胞产生细胞毒作用,且诱导细胞的凋亡率为29.52%,表明TRAIL-linker-HN具有双基因抑瘤的协同效应。
其他文献
【美国每日科学网站2月13日报道】题：当心情人节巧克力中的棕榈油加拿大蒙特利尔大学医院研究中心开展的一项新研究称,富含饱和脂肪的饮食不仅可能导致肥胖,还会使控制情绪和
文化是一个国家、民族发展的核心动力,对于推动社会的发展进步也有着重要的作用。本文主要介绍了文化与文化软实力、文化产业、经济等互相之间的联系,并且对我国文化建设未来
计算机视觉和图象处理技术在水果自动分选和分级中起着重要的作用 .因为缺陷检测的复杂性 ,水果表面缺陷的快速检测和识别一直是水果自动化分选和分级的障碍 .在实数域分形盒
互联网的迅猛发展,深刻改变了舆论的生成和传播方式,也改变了各种媒体的舆论生态。网络舆论的影响日益扩大,越来越引起学术界、传媒界及政府部门等广泛的关注。舆论影响从来
随着当今数字技术的飞跃发展,视频拍摄已经从传统的静态感光摄影走向了数字化的动态全景视频拍摄技术拍摄。如今将这一技术应用到非物质文化遗产的保护中具有十分重要的意义,
近年来，国内城市地铁建设如火如荼，“你方唱罢我登场”。但是由于一些主客观方面的原因，随之而来的是在施工过程中设计变更、工期延误、不可抗力等其他因素，导致业主和承包商扯皮
<正>一、绿色会计的概念和目标绿色会计,也称为绿色会计,是将环境科学、现代经济理论、可持续发展理论和传统的会计学相互结合,以自然环境资源和社会环境资源耗费应如何补偿
<正>资产减值准备的计提和转回一直是企业进行盈余操纵的重要手段,随着《企业会计准则第8号——资产减值》的颁布和实施,盈余操纵受到了一定遏制,但仍有许多企业利用资产减值
目的人工合成绿原酸(chlorogenic acid,CGA)完全抗原并进行鉴定,为制备绿原酸单克隆抗体奠定基础。方法采用活泼酯法,将绿原酸分别与牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)
针对传统的平面线弹性理论无法客观分析预应力混凝土桥梁中预应力效应和极限承载力的问题,采用三维实体退化单元模拟混凝土,用荷载等效移置模拟预应力,同时引入材料非线性,对