转录因子CTCF的克隆、表达及其抗体制备

来源 :生物技术通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户：Mr_Zhou

【摘要】

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用RT-PCR方法从HeLa细胞总RNA中扩增转录因子CTCF的cDNA序列,克隆至pGEM-T Easy载体上.将CTCF蛋白N段的编码序列亚克隆至pET22b(+)载体中,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,并

【作者】

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何莉朱旭东毛志勇朱恒奇黄培堂

【机构】

：

军事医学科学院,军事医学科学院

【出处】

：

生物技术通讯

【发表日期】

：

2004年5期

【关键词】

：

转录因子蛋白抗体制备诱导表达亚克隆细胞内 ET 纯化 CDNA序列总RNA CTCF transcription factor polyclon

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用RT-PCR方法从HeLa细胞总RNA中扩增转录因子CTCF的cDNA序列,克隆至pGEM-T Easy载体上.将CTCF蛋白N段的编码序列亚克隆至pET22b(+)载体中,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,并用镍柱进行亲和纯化.用纯化后的CTCF N段蛋白免疫家兔,获得CTCF的多克隆抗体,进而用于细胞内CTCF蛋白的免疫印迹检测.

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