γδT细胞的体外扩增及对不同肿瘤细胞的杀伤性研究

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目的

通过体外制备γδT细胞,研究γδT细胞对不同肿瘤细胞的杀伤性。

方法

采集2018年1月至3月第三军医大学新桥医院招募的20例健康志愿者外周静脉血,使用唑来膦酸联合白细胞介素-2(IL-2)对人外周血单个核细胞(PBMC)进行诱导扩增,获取γδT细胞。流式细胞仪检测第0、7、10、14、16天的细胞纯度。使用CCK-8法检测其对肿瘤细胞的杀伤性,以培养第14天的细胞作为效应细胞,以乳腺癌BCap-37、肝癌Bel-7402肿瘤细胞作为靶细胞,分别在效靶比5∶1、10∶1、20∶1下进行细胞杀伤活性检测。

结果

流式细胞检测第0、7、10、14、16天γδT细胞的纯度分别为(3.35±1.32)%、(50.76±5.76)%、(80.43±4.53)%、(90.56±3.34)%、(89.54±4.42)%,差异有统计学意义(F=18.431,P=0.012)。5∶1组、10∶1组、20∶1组的γδT细胞对BCap-37的杀伤率分别为(31.3±2.0)%、(48.7±1.6)%、(71.3±2.4)%,差异有统计学意义(F=16.724,P=0.016),进一步两两比较,10∶1组高于5∶1组(P=0.013),20∶1组高于5∶1组(P=0.017),20∶1组高于10∶1组(P=0.011),杀伤率随着效靶比的增高而增大。5∶1组、10∶1组、20∶1组的γδT细胞对Bel-7402的杀伤率分别为(34.5±2.0)%、(52.4±1.9)%、(74.5±1.6)%,差异有统计学意义(F=18.253,P=0.013),进一步两两比较,10∶1组高于5∶1组(P=0.015),20∶1组高于5∶1组(P=0.012),20∶1组高于10∶1组(P=0.015),杀伤率随着效靶比的增高而增大。

结论

使用唑来膦酸联合IL-2诱导PBMC可以获得高纯度的γδT细胞,扩增的γδT细胞对BCap-37和Bel-7402肿瘤细胞有明显的杀伤作用。

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