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摘要：输血在临床治疗中非常重要，输血科在输血前需要进行血清学检测，包括RH，ABO血型检测，和血清特异性抗体测定，抗体筛查，交叉配血实验。在医务人员很高严格的操作规范·，各种实验因素的影响也很重要。目前发现的有ABO血型，RH血型，MNS血型，Lewis血型等30余种，血型抗原300余种，其血型的抗原本质是一种糖蛋白和糖质，其中血型是由糖链末端的组成和结构所决定。的血型鉴定是否正确，直接关系患者生命安全，在临床治疗中可发现一些不规则抗体干扰血型鉴定，其中引起血型鉴定困难集中科室在血液科，肾内科，肿瘤科，新生儿科，呼吸科，消化科，对于不同科室的不同疾病，输血科要给予相应的输血指导，以便更有效，安全地输血。，同时，ABO血型系统中的各个血型与疾病的相关性也在本文具体叙述。深入了解血型与疾病的相关性。
关键词：血型;疾病;输血
ABSTRACT： Blood transfusion is very important in clinical treatment. Before blood transfusion， blood transfusion department needs to carry out serological test， including RH， Abo blood group test， serum specific antibody test， antibody screening and cross-matching test. In medical personnel very high strict operating standards， a variety of experimental factors are also important. At present， there are more than 30 kinds of Abo blood group， RH blood group， MNS blood group， Lewis Blood Group， and more than 300 kinds of blood group antigens. The accuracy of blood group identification is directly related to the life safety of patients. In clinical treatment， some irregular antibodies may be found to interfere with blood group identification， respiratory Department， Digestive Department， for different departments of different diseases， blood transfusion department to give the corresponding blood transfusion guidance， in order to more effective， safe blood transfusion.
1.血型鉴定困难集中的疾病及原因
1.1其中血液科的疑难血型鉴定最为复杂，引起的疾病总结多为自身免疫性溶血性贫血（AIHA），急性白血病，多发性骨髓瘤，新生儿溶血病等，其可能与其疾病发展时ABO血型抗原合成受阻有关，AIHA对血型鉴定的影响主要是免疫球蛋白和（和）或补体与红细胞膜结合，或稀释红细胞的溶液中含有高浓度的蛋白质，引起红细胞破裂，从而出现溶血性贫血，影响ABO抗原抗体分布，对AIHA患者（直抗阳性）用凝聚氨法测定ABO血型及RH血型，如果存在正反定性不一致的情况，需要利用氯奎做吸收放散实验，对正反定型不符的血型进行氯喹放散后再进行ABO血型检测和RH系统的检测，如果出现阳性的抗筛结果，需要对其抗体特异性进行特殊检测。这者进行抗体特异性鉴定，致敏后红细胞可发生特异性凝集。人球蛋白试验阳性和正反定型不和者。如果对多位患者的位中RH表型鉴定为阴性，实则为阳性的案例，如果用氯喹做放散试验后，其RH血型为正确判定，在这些病患含有相同种类的抗体，也有患者具有特异性抗体，顾可得出，AIHA患者自身抗体干扰ABO血型鉴定。发生凝集其致敏抗体可为IgG或者IgG+C3，其中抗体类型可为温抗体，冷抗体，冷-热混合抗体这些抗体不仅凝集患者红细胞，也会凝集供血者红细胞，严重影响血型鉴定。抗人球蛋白试验，取溶血者6毫升静脉血，离心9分钟，让血清与红细胞分离，并用生理盐水洗涤红细胞三次，将配好的浓度百分之6的行细胞进行直抗与间抗试验。同时多次进行交叉配血试验，并进对比可观察出直抗、间抗强度越强，交叉配血的阳性率越高，配血难度就越大，即正相关。所以，可得出结论，AIHA患者直抗试验强度与造成正反定性不符与配血不合几率成正相关。用氯喹分散试验可减少自身抗体影响减少发生正反定性不符与配血不合的概率。
利用试管离心方法法测定ABO与RH血型鉴定血型;先用DTT在温箱中处理相应患者的红细胞，如果直接抗人球蛋白试验阳性，则用其红细胞处理，并鉴定血型，抗体筛查和鉴定：做完吸收试验后利用试管离心法测出是否有天然抗体。交叉配血：采用盐水凝聚胺法与LISS/Coombs卡法。如果正定型出现问题，需要想办法排除其自身抗体对其的干扰因素：如果是温抗体温抗体中的DAT强阳性标本对试管法血型鉴定干扰，如果出现非特异性弱凝集。则需要对其进行血型测定。冷抗体和混合抗体红细胞会发生自凝，使用温生理盐水洗涤多次因冷抗体与混合抗体发生自凝的红细胞，并DTT处理，然后进行ABO血型卡式鉴定。一些抗体对血型的反定型也有干扰，其中有冷抗体和混合型抗体，如果想排除其干扰需在37℃水浴箱中孵育10钟后，用自身抗体吸收后试管和普通试管法鉴定结果。温抗体和冷抗体筛选结果、交叉配血结果。采用SPSS 1統计软件处理数统计学方法，表示，比较利用t检验，计数资料采用x2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。结果自身抗体分型分析421例自身免疫性溶血性贫血患者中，温抗体361例（85.75%），冷抗体19例（4.51%），混合型抗体41例（9.74%）。ABO和RH血型鉴定正定型中：90例存在抗体干扰，其中温抗体35例，冷抗体和混合抗体55例。反定型中存在60例干扰，19例冷抗体和41例混合型抗体。 顾得知，自身免疫性溶血性贫血主要包括有几点：很多自身抗体存在于患者体内，并且其自身抗体可以凝集红细胞，其中的自身抗体包括温抗体，混合抗体，冷抗体是引起该疾病的过程中的主要因素。自免溶贫患者在输血前3项检查的解决对策：①血型鉴定，如果ABO血型或者RH血型出现问题，则一般不是温抗体的原因，一些非特异性会因为直抗阳性，而做正定型时出现，而改为利用血卡式检测法此后现象就会消失;冷凝集由冷抗体产生，正定型产生的问题大多可由温盐水洗涤后解决，利用25度的盐水多次洗涤后可以解决正定型产生的问题，如果反定型试验时产生的凝集，通过温浴器加温后，在做吸收实验，都完成后再利用试管法做反定型实验。②抗体检测，对381例有有自身抗体并且是温抗体58例，利用LISS的直抗试验可以得出抗D抗体10位，抗-Ce抗体42例，抗M抗体6例，抗-Jka4③交叉配血：具有自身抗体并且其抗体有特异性者，应选择献血者没有抗体对应抗原的红细胞，采用LISS/直抗的卡式或者经典的试管法做配血试验，应选择献血者没有同种抗体对应抗原的红细胞，如果全部凝集且存在同种抗体存在同种抗体且全凝集素者，采用经典抗人球试验进行交叉配血。
1.2目前白血病引起血型很难鉴定可能有以下几个因素GT的产生减少会使A抗原与B抗原减少，二糖基转移酶又是有A与B基因表达，因为ABO基因对A抗原B抗原H抗原的形成起作用，其中GT起很重要的作用，GT的活性消失可能会因为相应基因的非正常表达，这会使A抗原，B抗原减少，其转换的原料H抗原也减少。ABO表达异常可能归因于沉默机制：作用于A基因B基因O基因和与H基因，其多条等位基因可能会是失活。其中基因的甲基化是其中的一个重要机制，甲基化ABO基因的近端，其甲基化的程度越高，其ABO血型抗原的活跃程度就越低，从而导致A、B抗原的表达相应的减少。对白血病细胞系进行去甲基化，会发现ABO基因的抗原表达会恢复，从而可以得出白血病患者与基因的甲基化相关2）白血病时大量异常白细胞，RBC恶性增值，未发育成熟的红细胞大量增殖，已发育完成的红细胞大量降低或大量形变导致功能丧失，其相应的RBC上的抗原丧失;而当白血病人病情好转时，相应削弱的抗原又会重新回到正常水。3）人类的ABO基因有特定的位点，而病毒可使机体癌变致的癌基因也在此这个位点，因此，我们可以大胆地推测，病毒的感染也与抗原减弱相关，从而导致血液病患者RBC上的A和（或）B基因表达减少或减弱。
恶性血液病所致的抗原削弱，不是只有ABO抗原，别的血型抗原也可能会被削弱，且程度强弱不同，互相互不影响，如果一个AB血型的患者，但却只有A抗原削弱而B抗原不削弱，这与上述论点是相符的。如果这例患者恢复，则会使血型恢复到正常状态，这与“白血病所导致的血型抗原减弱或消失是暂时的，如果病情缓解相应的血型也会变得正常。现在白血病引得的血型抗原减弱使越开越多的科学家投入更多的关注，有很多人报道血型减弱的程度与白血病的类型，预后，存在很强的正相关性。在白血病中抗原的变化，既不同于血型抗原而且又与恶性细胞有很强的关联性。综上可得出，检测恶性肿瘤患者的血型抗原，不仅起到鉴定血型的作用，还可能作为肿瘤特有的靶向位点，并应用于肿瘤的临床研究。在输血科的工作，如果出现正反定型不符的患者应加以重视，应用常规的血型血清学鉴定方法，往往不易准确测定出血型，甚至发生错误测定，给临床安全有效输血造成影响，所以必须进行吸收放散等测定等试验，并了解病患是否有前期的基础疾病。必要时可以结合基因分型技术、直接基因测序等分子生物学等检测方法来最终确定血型的正确，正洋更有助于临床输血的安全性对于抗原减少的ABO血型正反定型不一致的患者，在血型确认后应根据其血型相应输血，在特殊情况下可以输注O型洗涤RBC。其中运用试剂抗-A和抗-B（上海血液生物医药有限公司）批号20201119，上海生物谱细胞，微柱凝胶卡，人ABO反定型用红细胞试剂（上海血液生物）A1和B细胞批号20215318，baso生物有限公司Baso低离子液，专用离心机（安徽中科中佳科学仪器有限公司），长春博研科技公司孵育器，北京永光明医疗仪器厂37度水浴箱，通过采用微柱凝胶法，试管法，吸收与放散，抗筛试验。在18例恶性肿瘤引起血型鉴定困难的标本中，有12例是产生了冷抗体（66.7%），有4例（百分之22.2）患者出现血清学出现了A和（或）B抗原减弱，有输血史致产生不规则抗体2例（11.1%）。镜下可见红细胞缗钱状凝集，与真性凝集很难区分，然而把受检的红细胞放在37度水浴箱加温并用生理盐水加温洗涤三次后，凝集可部分散开，均通过吸收放散试验后，对其红细胞和血浆进行血型鉴定可得出正反定型相符的结果，人的血型通常情况下一生不会变，但一些恶性肿瘤比如急性白血病可能会引起ABO血型系统的抗原减弱或消失。]最开始该因为一些专家观察到一些急性白血病的A抗原相对普通人来讲非常弱，并且此类患者建康时A抗原与正常人一样。而后，随着研究的深入，人们逐渐发现白血病人的ABO系统抗原减弱会或消失，会给血型鉴定制造困难，顾需要给与相当重视，但是常规的实验不足以证实抗原减弱的根本原因
1.3多发性骨髓瘤患者主要体内大量浆细胞异常增生，其特征是可以把正常浆细胞转化恶性的骨髓瘤细胞，顾可分泌大量免疫球蛋白其称作M蛋白或副蛋白，导致IgM抗体缺失或减少对此可造成体内正常免疫球蛋白合成不足，从而导致ABO血型中的抗体减少。在多发性骨髓瘤患者中随机抽取60例病例，运用试剂抗-A和抗-B（上海血液生物医药有限公司）批号20201119，上海生物谱细胞，微柱凝胶卡，人ABO反定型用红细胞试剂（上海血液生物）A1和B细胞批号20215318，珠海贝索生物有限公司Baso低离子液，血型血清学离心机（安徽中科中佳科学仪器有限公司），长春博研科技公司孵育器，北京永光明医疗仪器厂37度水浴箱，通过采用微柱凝胶法，盐水法，吸收放散，唾液型血型物质鉴定以及抗体筛查等方法。血清通过作用试管法加强病患反定型血浆量，把试管放在温箱10分钟后增加反应强度，离心多次观察结果，得出抗體减弱引起血型鉴定困难24例（40%），冷抗体干扰引起鉴定困难8例（13.3%），此外，M蛋白的大量分泌可导致患者血浆中球蛋白含量增多，白蛋白球蛋白比例倒置，在球蛋白增多的情况下，可以包被RBC上的的电荷降低，红细胞之间的作用力降低会导致假性凝集，为证实此现象，用盐水法离心后，反定型中管弃去上面悬浮液，加入生理盐水重悬后再次离心3分钟观，并在显微镜下观察，可见到假性凝集消散，而抗原抗体引起的凝集则不会消散。
关键词：血型;疾病;输血
ABSTRACT： Blood transfusion is very important in clinical treatment. Before blood transfusion， blood transfusion department needs to carry out serological test， including RH， Abo blood group test， serum specific antibody test， antibody screening and cross-matching test. In medical personnel very high strict operating standards， a variety of experimental factors are also important. At present， there are more than 30 kinds of Abo blood group， RH blood group， MNS blood group， Lewis Blood Group， and more than 300 kinds of blood group antigens. The accuracy of blood group identification is directly related to the life safety of patients. In clinical treatment， some irregular antibodies may be found to interfere with blood group identification， respiratory Department， Digestive Department， for different departments of different diseases， blood transfusion department to give the corresponding blood transfusion guidance， in order to more effective， safe blood transfusion.
1.血型鉴定困难集中的疾病及原因
1.1其中血液科的疑难血型鉴定最为复杂，引起的疾病总结多为自身免疫性溶血性贫血（AIHA），急性白血病，多发性骨髓瘤，新生儿溶血病等，其可能与其疾病发展时ABO血型抗原合成受阻有关，AIHA对血型鉴定的影响主要是免疫球蛋白和（和）或补体与红细胞膜结合，或稀释红细胞的溶液中含有高浓度的蛋白质，引起红细胞破裂，从而出现溶血性贫血，影响ABO抗原抗体分布，对AIHA患者（直抗阳性）用凝聚氨法测定ABO血型及RH血型，如果存在正反定性不一致的情况，需要利用氯奎做吸收放散实验，对正反定型不符的血型进行氯喹放散后再进行ABO血型检测和RH系统的检测，如果出现阳性的抗筛结果，需要对其抗体特异性进行特殊检测。这者进行抗体特异性鉴定，致敏后红细胞可发生特异性凝集。人球蛋白试验阳性和正反定型不和者。如果对多位患者的位中RH表型鉴定为阴性，实则为阳性的案例，如果用氯喹做放散试验后，其RH血型为正确判定，在这些病患含有相同种类的抗体，也有患者具有特异性抗体，顾可得出，AIHA患者自身抗体干扰ABO血型鉴定。发生凝集其致敏抗体可为IgG或者IgG+C3，其中抗体类型可为温抗体，冷抗体，冷-热混合抗体这些抗体不仅凝集患者红细胞，也会凝集供血者红细胞，严重影响血型鉴定。抗人球蛋白试验，取溶血者6毫升静脉血，离心9分钟，让血清与红细胞分离，并用生理盐水洗涤红细胞三次，将配好的浓度百分之6的行细胞进行直抗与间抗试验。同时多次进行交叉配血试验，并进对比可观察出直抗、间抗强度越强，交叉配血的阳性率越高，配血难度就越大，即正相关。所以，可得出结论，AIHA患者直抗试验强度与造成正反定性不符与配血不合几率成正相关。用氯喹分散试验可减少自身抗体影响减少发生正反定性不符与配血不合的概率。
利用试管离心方法法测定ABO与RH血型鉴定血型;先用DTT在温箱中处理相应患者的红细胞，如果直接抗人球蛋白试验阳性，则用其红细胞处理，并鉴定血型，抗体筛查和鉴定：做完吸收试验后利用试管离心法测出是否有天然抗体。交叉配血：采用盐水凝聚胺法与LISS/Coombs卡法。如果正定型出现问题，需要想办法排除其自身抗体对其的干扰因素：如果是温抗体温抗体中的DAT强阳性标本对试管法血型鉴定干扰，如果出现非特异性弱凝集。则需要对其进行血型测定。冷抗体和混合抗体红细胞会发生自凝，使用温生理盐水洗涤多次因冷抗体与混合抗体发生自凝的红细胞，并DTT处理，然后进行ABO血型卡式鉴定。一些抗体对血型的反定型也有干扰，其中有冷抗体和混合型抗体，如果想排除其干扰需在37℃水浴箱中孵育10钟后，用自身抗体吸收后试管和普通试管法鉴定结果。温抗体和冷抗体筛选结果、交叉配血结果。采用SPSS 1統计软件处理数统计学方法，表示，比较利用t检验，计数资料采用x2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。结果自身抗体分型分析421例自身免疫性溶血性贫血患者中，温抗体361例（85.75%），冷抗体19例（4.51%），混合型抗体41例（9.74%）。ABO和RH血型鉴定正定型中：90例存在抗体干扰，其中温抗体35例，冷抗体和混合抗体55例。反定型中存在60例干扰，19例冷抗体和41例混合型抗体。 顾得知，自身免疫性溶血性贫血主要包括有几点：很多自身抗体存在于患者体内，并且其自身抗体可以凝集红细胞，其中的自身抗体包括温抗体，混合抗体，冷抗体是引起该疾病的过程中的主要因素。自免溶贫患者在输血前3项检查的解决对策：①血型鉴定，如果ABO血型或者RH血型出现问题，则一般不是温抗体的原因，一些非特异性会因为直抗阳性，而做正定型时出现，而改为利用血卡式检测法此后现象就会消失;冷凝集由冷抗体产生，正定型产生的问题大多可由温盐水洗涤后解决，利用25度的盐水多次洗涤后可以解决正定型产生的问题，如果反定型试验时产生的凝集，通过温浴器加温后，在做吸收实验，都完成后再利用试管法做反定型实验。②抗体检测，对381例有有自身抗体并且是温抗体58例，利用LISS的直抗试验可以得出抗D抗体10位，抗-Ce抗体42例，抗M抗体6例，抗-Jka4③交叉配血：具有自身抗体并且其抗体有特异性者，应选择献血者没有抗体对应抗原的红细胞，采用LISS/直抗的卡式或者经典的试管法做配血试验，应选择献血者没有同种抗体对应抗原的红细胞，如果全部凝集且存在同种抗体存在同种抗体且全凝集素者，采用经典抗人球试验进行交叉配血。
1.2目前白血病引起血型很难鉴定可能有以下几个因素GT的产生减少会使A抗原与B抗原减少，二糖基转移酶又是有A与B基因表达，因为ABO基因对A抗原B抗原H抗原的形成起作用，其中GT起很重要的作用，GT的活性消失可能会因为相应基因的非正常表达，这会使A抗原，B抗原减少，其转换的原料H抗原也减少。ABO表达异常可能归因于沉默机制：作用于A基因B基因O基因和与H基因，其多条等位基因可能会是失活。其中基因的甲基化是其中的一个重要机制，甲基化ABO基因的近端，其甲基化的程度越高，其ABO血型抗原的活跃程度就越低，从而导致A、B抗原的表达相应的减少。对白血病细胞系进行去甲基化，会发现ABO基因的抗原表达会恢复，从而可以得出白血病患者与基因的甲基化相关2）白血病时大量异常白细胞，RBC恶性增值，未发育成熟的红细胞大量增殖，已发育完成的红细胞大量降低或大量形变导致功能丧失，其相应的RBC上的抗原丧失;而当白血病人病情好转时，相应削弱的抗原又会重新回到正常水。3）人类的ABO基因有特定的位点，而病毒可使机体癌变致的癌基因也在此这个位点，因此，我们可以大胆地推测，病毒的感染也与抗原减弱相关，从而导致血液病患者RBC上的A和（或）B基因表达减少或减弱。
恶性血液病所致的抗原削弱，不是只有ABO抗原，别的血型抗原也可能会被削弱，且程度强弱不同，互相互不影响，如果一个AB血型的患者，但却只有A抗原削弱而B抗原不削弱，这与上述论点是相符的。如果这例患者恢复，则会使血型恢复到正常状态，这与“白血病所导致的血型抗原减弱或消失是暂时的，如果病情缓解相应的血型也会变得正常。现在白血病引得的血型抗原减弱使越开越多的科学家投入更多的关注，有很多人报道血型减弱的程度与白血病的类型，预后，存在很强的正相关性。在白血病中抗原的变化，既不同于血型抗原而且又与恶性细胞有很强的关联性。综上可得出，检测恶性肿瘤患者的血型抗原，不仅起到鉴定血型的作用，还可能作为肿瘤特有的靶向位点，并应用于肿瘤的临床研究。在输血科的工作，如果出现正反定型不符的患者应加以重视，应用常规的血型血清学鉴定方法，往往不易准确测定出血型，甚至发生错误测定，给临床安全有效输血造成影响，所以必须进行吸收放散等测定等试验，并了解病患是否有前期的基础疾病。必要时可以结合基因分型技术、直接基因测序等分子生物学等检测方法来最终确定血型的正确，正洋更有助于临床输血的安全性对于抗原减少的ABO血型正反定型不一致的患者，在血型确认后应根据其血型相应输血，在特殊情况下可以输注O型洗涤RBC。其中运用试剂抗-A和抗-B（上海血液生物医药有限公司）批号20201119，上海生物谱细胞，微柱凝胶卡，人ABO反定型用红细胞试剂（上海血液生物）A1和B细胞批号20215318，baso生物有限公司Baso低离子液，专用离心机（安徽中科中佳科学仪器有限公司），长春博研科技公司孵育器，北京永光明医疗仪器厂37度水浴箱，通过采用微柱凝胶法，试管法，吸收与放散，抗筛试验。在18例恶性肿瘤引起血型鉴定困难的标本中，有12例是产生了冷抗体（66.7%），有4例（百分之22.2）患者出现血清学出现了A和（或）B抗原减弱，有输血史致产生不规则抗体2例（11.1%）。镜下可见红细胞缗钱状凝集，与真性凝集很难区分，然而把受检的红细胞放在37度水浴箱加温并用生理盐水加温洗涤三次后，凝集可部分散开，均通过吸收放散试验后，对其红细胞和血浆进行血型鉴定可得出正反定型相符的结果，人的血型通常情况下一生不会变，但一些恶性肿瘤比如急性白血病可能会引起ABO血型系统的抗原减弱或消失。]最开始该因为一些专家观察到一些急性白血病的A抗原相对普通人来讲非常弱，并且此类患者建康时A抗原与正常人一样。而后，随着研究的深入，人们逐渐发现白血病人的ABO系统抗原减弱会或消失，会给血型鉴定制造困难，顾需要给与相当重视，但是常规的实验不足以证实抗原减弱的根本原因
1.3多发性骨髓瘤患者主要体内大量浆细胞异常增生，其特征是可以把正常浆细胞转化恶性的骨髓瘤细胞，顾可分泌大量免疫球蛋白其称作M蛋白或副蛋白，导致IgM抗体缺失或减少对此可造成体内正常免疫球蛋白合成不足，从而导致ABO血型中的抗体减少。在多发性骨髓瘤患者中随机抽取60例病例，运用试剂抗-A和抗-B（上海血液生物医药有限公司）批号20201119，上海生物谱细胞，微柱凝胶卡，人ABO反定型用红细胞试剂（上海血液生物）A1和B细胞批号20215318，珠海贝索生物有限公司Baso低离子液，血型血清学离心机（安徽中科中佳科学仪器有限公司），长春博研科技公司孵育器，北京永光明医疗仪器厂37度水浴箱，通过采用微柱凝胶法，盐水法，吸收放散，唾液型血型物质鉴定以及抗体筛查等方法。血清通过作用试管法加强病患反定型血浆量，把试管放在温箱10分钟后增加反应强度，离心多次观察结果，得出抗體减弱引起血型鉴定困难24例（40%），冷抗体干扰引起鉴定困难8例（13.3%），此外，M蛋白的大量分泌可导致患者血浆中球蛋白含量增多，白蛋白球蛋白比例倒置，在球蛋白增多的情况下，可以包被RBC上的的电荷降低，红细胞之间的作用力降低会导致假性凝集，为证实此现象，用盐水法离心后，反定型中管弃去上面悬浮液，加入生理盐水重悬后再次离心3分钟观，并在显微镜下观察，可见到假性凝集消散，而抗原抗体引起的凝集则不会消散。