【摘 要】
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为探讨黑枸杞花青素对小鼠巨噬细胞RAW264.7 TLR4/NF-κB炎性通路和mTOR自噬通路交互作用的影响,本实验体外培养RAW264.7细胞,用脂多糖作用于小鼠巨噬细胞RAW264.7诱导其损伤建造炎症模型,将细胞分为对照组、花青素组(25μg/mL)、脂多糖组(1μg/mL)、花青素(25μg/mL)+脂多糖(1μg/mL)组、脂多糖(1μg/mL)+雷帕霉素(100 nmol/L)组、花
【基金项目】
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青海省科技厅应用基础研究项目(2018-ZJ-759); 青海省高端创新人才千人计划;
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为探讨黑枸杞花青素对小鼠巨噬细胞RAW264.7 TLR4/NF-κB炎性通路和mTOR自噬通路交互作用的影响,本实验体外培养RAW264.7细胞,用脂多糖作用于小鼠巨噬细胞RAW264.7诱导其损伤建造炎症模型,将细胞分为对照组、花青素组(25μg/mL)、脂多糖组(1μg/mL)、花青素(25μg/mL)+脂多糖(1μg/mL)组、脂多糖(1μg/mL)+雷帕霉素(100 nmol/L)组、花青素(25μg/mL)+脂多糖(1μg/mL)+雷帕霉素(100 nmol/L)组、脂多糖(25μg/mL)+BAY11-7082(20μmol/L)组、花青素(25μg/mL)+脂多糖(1μg/mL)+BAY11-7082(20μmol/L)组,利用RT-PCR、Western Blot检测黑枸杞花青素结合mTOR通路抑制剂雷帕霉素(RAPA)和NF-κB抑制剂BAY11-7082处理细胞后相关基因的mRNA和蛋白表达。结果显示:当mTOR被抑制后,与脂多糖+雷帕霉素组对比,花青素+脂多糖+雷帕霉素组TRAF6 mRNA表达水平和NF-κBp65蛋白表达水平下调(P<0.05);当NF-κB被抑制后,与脂多糖+BAY11-7082对比,花青素+脂多糖+BAY11-7082组ULK1 mRNA表达水平下调(P<0.05)。结果表明,黑枸杞花青素具有抗炎作用,且mTOR通路对TLR4/NF-κB通路具有调控作用,mTOR通路可能是自噬调节炎症等免疫反应的信号途径。
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