【摘 要】
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血红蛋白是红细胞的主要组成成分,在高等动物中分布广泛,具有运载氧气等多种重要功能。然而,软体动物血红蛋白的相关研究较少。魁蚶(Scapharca broughtonii)作为重要的大型经
【机 构】
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农业农村部海洋渔业可持续发展重点实验室、中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室,水产科学国家级实验教学示范中心、上海海洋大学
【基金项目】
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中国水产科学研究院黄海水产研究所基本科研业务费专项资金(20603022016001,20603022017002),农业农村部农业国际合作交流项目--“一带一路”热带国家水产养殖科技创新合作项目.
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血红蛋白是红细胞的主要组成成分,在高等动物中分布广泛,具有运载氧气等多种重要功能。然而,软体动物血红蛋白的相关研究较少。魁蚶(Scapharca broughtonii)作为重要的大型经济蚶类,其血淋巴因含有红细胞而不同于其他多数双壳贝类。为明确魁蚶血红蛋白基因的结构特征、组织分布以及发生、免疫活性等特点,本研究以从魁蚶转录组数据库中获得的部分序列为基础,通过cDNA末端快速扩增(rapid amplication of cDNA ends,RACE)技术克隆获得了一种魁蚶血红蛋白基因cDNA全长序列(命名为SbHbⅠ),并进行了不同条件下mRNA表达研究。序列和结构分析表明,SbHbⅠ基因cDNA全长为867 bp,其中包括长度为483 bp的开放阅读框(Open Reading Frame,ORF),编码160个氨基酸,预测蛋白分子量为17.5 kDa,理论等电点为9.68;氨基酸序列具有多个血红素结合位点,序列与其他物种的相似度范围为57%-93%,与蚶科相似度较高。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果表明,在魁蚶成体的斧足、鳃、外套膜、闭壳肌、血淋巴、肝胰腺,以及受精卵至发育23天的幼虫体内均能检测到SbHbⅠ基因;该基因在成体血淋巴中表达量最高,与其他5个组织表达量存在显著差异(p<0.05);受精卵至23d幼虫期的表达,基本呈现为先降后升的趋势,且在12天时急剧上升(p<0.05);鳗弧菌(Vibrio anguillarum)刺激和低氧胁迫后,血淋巴中SbHbⅠ基因的表达均呈先上升后下降的趋势,表达量最高值均出现在16 h。本研究丰富了贝类血红蛋白相关研究资料。
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