【摘 要】
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目的：构建葡激酶（Staphylokinase,SAK）基因的原核表达质粒,在大肠杆菌中表达SAK蛋白质,纯化并初步鉴定其生物学活性。方法：基于生物信息学方法分析优化基因序列,使用基因合成技术
【机 构】
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重庆医科大学附属第一医院心内科,重庆医科大学感染病性疾病分子生物实验室
【基金项目】
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重庆市科委资助项目（编号：2009BB5406）
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目的：构建葡激酶（Staphylokinase,SAK）基因的原核表达质粒,在大肠杆菌中表达SAK蛋白质,纯化并初步鉴定其生物学活性。方法：基于生物信息学方法分析优化基因序列,使用基因合成技术合成SAK基因,转化感受态大肠杆菌B834菌株,使在其中表达,利用离子交换柱,分子筛（Superdex 75）等进行分离纯化,应用纤维蛋白平板溶圈法测定评价其生物活性。结果：SAK在大肠杆菌中以可溶上清的方式高效表达,利用离子交换柱和分子筛等纯化效果良好,纯度达95%,体外实验显示其纤溶活性与尿激酶标准品相当。结论：
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