【摘 要】
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目的观察过表达脑红蛋白（neuroglobin,NGB）对水溶性β-淀粉样蛋白片段1-42(Amyloid-beta 1-42,Aβ1-42)诱导SH-SY5Y细胞线粒体损伤的保护作用,并探讨其机制。方法体外培养SH-SY
【机 构】
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重庆医科大学基础医学院神经科学研究中心;
【基金项目】
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国家自然科学基金青年科学基金项目(81100948)
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目的观察过表达脑红蛋白（neuroglobin,NGB）对水溶性β-淀粉样蛋白片段1-42(Amyloid-beta 1-42,Aβ1-42)诱导SH-SY5Y细胞线粒体损伤的保护作用,并探讨其机制。方法体外培养SH-SY5Y细胞,经Aβ1-42预处理后转染质粒p EGFP-NGB及空载体p EGFP-N1,同时设空白对照组（未转染）。MTT法、流式细胞术及JC-1染色法分别检测过表达NGB对Aβ1-42诱导损伤的SH-SY5Y细胞存活率、细胞凋亡及线粒体膜电位的影响,采用相应试剂盒检测细胞内半胱氨酸蛋白酶3（caspase 3）、caspase 9、ATP及细胞色素C（cytochrome C,cyto C）氧化酶活性;Western blot法检测细胞中cyto C、凋亡蛋白酶激活因子-1（apoptosis protease activating factor-1,Apaf-1）、caspase 3及caspase 9蛋白的表达水平。结果过表达NGB可显著提高Aβ1-42诱导损伤SH-SY5Y细胞的存活率（P<0.001）及细胞中cyto C氧化酶、ATP的活性（P<0.01）;可显著抑制损伤细胞的凋亡（P<0.05）、线粒体膜电位的降低（P<0.001）及细胞中caspase 3、caspase 9的活性（P<0.01）;可明显降低损伤细胞内cyto C、Apaf-1、caspase 3及caspase 9蛋白的表达水平（P<0.05）。结论 NGB可显著抑制Aβ1-42诱导的SH-SY5Y细胞损伤,促进其增殖,其机制可能与NGB恢复线粒体功能及抑制cyto C触发细胞凋亡密切相关。
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