论文部分内容阅读
摘要：目的 优选心舒通颗粒的最佳提取工艺。方法 采用L9（34）正交试验。以丹参酮ⅡA含量为评价指标，以乙醇用量、醇浓度和提取时间为考察因素，筛选心舒通颗粒的最佳醇提条件；以丹参素、葛根素和干膏率为评价指标，以加水量、煎煮次数和提取时间为考察因素，筛选心舒通颗粒的最佳水提条件。结果 最佳醇提工艺为加8倍量80%乙醇，回流提取2次，每次45 min；最佳水提工艺为加8倍量水，提取3次，每次45 min。结论 优选得到的提取工艺稳定、合理、可行。
关键词：心舒通颗粒；丹参酮ⅡA；丹参素；葛根素；提取工艺
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2013.03.024
中图分类号：R283.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2013）03-0062-04
心舒通颗粒为成都中医药大学附属医院的在研医院制剂，其处方源自国医大师郭子光教授治疗心血管疾病60年的临床经验总结，由丹参、葛根、川芎、苦参等7味药组成，具有益气活血、宽胸止痛等功效，临床用于无症状性心肌缺血、冠心病心绞痛、冠心病“搭桥”手术或“支架”后再阻塞等。在对本方进行剂型改进时，以确保疗效为前提，再结合制剂的使用、携带方便性考虑，确定将本处方开发成颗粒剂。先将丹参醇提，以丹参酮ⅡA含量为指标考察醇提工艺；然后将丹参药渣与其他药一起水提，将醇提后的药渣与葛根等药味混合水提，并将丹参素和臣药葛根中的葛根素含量作为指标考察水提工艺。通过正交试验优选提取工艺，为本制剂的规模化生产提供技术参数。
1 仪器与试药
HP-1100高效液相色谱仪（美国惠普）：四元梯度泵，自动进样器，柱温箱；BP211D电子分析天平（Sartorius，德国）；SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；RE-S2C旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）。
丹参酮ⅡA对照品（供含量测定用，批号110766-200619）、丹参素钠对照品（供含量测定用，批号110855-200809）、葛根素对照品（供含量测定用，批号110752-200712）均购于中国药品生物制品检定所；丹参（批号1201075）、葛根（批号1202086）、川芎（批号1201045）、苦参（批号1201036）、郁金（批号1201037）、薤白（批号1201035）、水蛭（批号1202023）均购于四川新荷花中药饮片股份有限公司，经成都中医药大学附属医院药剂科盛荣副主任中药师鉴定，符合2010年版《中华人民共和国药典》（一部）要求；甲醇为色谱纯，水为蒸馏水，其余均为分析纯。
2 醇提工艺正交试验
2.1 丹参酮ⅡA含量测定
2.1.1 色谱条件 色谱柱：Phenomenex C18（0DS，4.6 mm×250 mm，5 ?m）；流动相：甲醇-水（73∶27）[1]；流速：1.0 mL/min；柱温：30 ℃；进样量：10 ?L；检测波长：270 nm。理论板数按丹参酮ⅡA峰计不低于2 000。
2.1.2 线性关系考察 精密称取丹参酮ⅡA对照品9.56 mg，置于100 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成丹参酮ⅡA含量为0.095 6 mg/mL的对照品溶液。精密吸取丹参酮ⅡA对照品溶液2、3、5、10、20、25 mL置25 mL量瓶中，加甲醇定容，摇匀。按“2.1.1”项下色谱条件测定，以丹参酮ⅡA峰面积为纵坐标，浓度为横坐标进行线性回归。得回归方程：Y=55 643.97X+1.47（r=0.999 9）。结果表明，丹参酮ⅡA峰面积与进样量在0.076 48～0.956 0 ?g之间呈良好线性关系。
2.1.3 样品含量测定 精密吸取醇提工艺正交试验样品液2 mL，置25 mL量瓶中，加甲醇定容，摇匀，微孔滤膜（0.45 ?m）滤过，取续滤液，即得供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 ?L，注入液相色谱仪，测定。色谱图见图1。
2.2 因素水平的确定
根据预试结果及丹参药材的性质，以丹参酮ⅡA含量为考察指标，选定溶媒用量（A）、乙醇浓度（B）、提取时间（C）作为考察因素[2-3]，提取次数取2次，因素水平见表1。
2.3 醇提正交试验及方差分析
按处方比例称取丹参药材100 g，按L9（34）正交试验条件进行回流提取，滤过，合并滤液，滤液浓缩并定容至500 mL。正交试验结果见表2，方差分析见表3。
极差R值显示，各因素作用主次为：B（乙醇浓度）>A（溶媒用量）>C（提取时间）。影响提取效果的方差分析中，由于C因素的离差平方和比空白列的离差平方和小，为方差分析的准确度将其合并到误差项中，同时自由度也一并合并，结果显示，B对提取效果有显著影响，A和C对提取效果无显著影响，考虑到實际生产，缩短生产周期，降低生产成本等综合因素，确定丹参醇提工艺为A1B3C1，即加8倍80%乙醇，提取2次，每次提取45 min。
2.4 醇提工艺验证试验
称取3 倍处方量药材，按最佳提取工艺分别制备3批样品，结果表明，优选出的组合A1B3C1验证试验结果稳定，丹参酮ⅡA含量为1.313～1.389 mg/g。
3 水提工艺正交试验
3.1 丹参素的含量测定
3.1.1 色谱条件 色谱柱：依利特C18（BDS，4.6 mm×250 mm， 5 ?m）；流动相：甲醇-0.5%乙酸（11∶89）；流速：1.0 mL/min；柱温：30 ℃；进样量：10 ?L；检测波长：280 nm。理论塔板数按丹参素钠计不低于6 000[4-6]。
3.1.2 线性关系考察 精密称取丹参素钠对照品30.26 mg，置于50 mL量瓶中，加20%甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，制成0.605 2 mg/mL的对照品溶液。精密吸取丹参素钠对照品溶液2、3、5、10、25 mL置25 mL量瓶中，加20%甲醇定容，摇匀，即得。按“3.1.1”项下色谱条件测定，以丹参素钠峰面积为纵坐标，浓度为横坐标进行线性回归。得回归方程：Y=4 987.63X+6.87（r=0.999 9）。结果表明，丹参素钠峰面积与进样量在0.484 16～6.052 ?g之间呈良好线性关系。 3.1.3 样品含量测定 精密吸取水提工艺正交试验样品液10 mL，置50 mL容量瓶中，加甲醇定容，摇匀，微孔滤膜（0.45 ?m）滤过，取续滤液，即得供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 ?L，注入液相色谱仪，测定。色谱图见图2。
3.2 葛根素含量测定
3.2.1 色谱条件 色谱柱：Boston C18（ODS，4.6 mm×250 mm， 5 ?m）；流动相：甲醇-水（25∶75）[7]；流速：1.0 mL/min；柱温：30 ℃；进样量：5 ?L；检测波长：250 nm。理论塔板数按葛根素峰计不低于4 000。
3.2.2 线性关系的考察 精密称取葛根素对照品22.24 mg，置50 mL量瓶中，加30%乙醇溶解并定容至刻度，摇匀，制成0.444 8 mg/mL的对照品溶液。分别精密吸取对照品溶液1、2、3、5、10、20于20 mL容量瓶中，加30%乙醇定容，按“3.2.1”项下色谱条件测定。以葛根素峰面积为纵坐标，浓度为横坐标进行线性回归。得回归方程：Y=51 456.57X-57.563 5（r=0.999 9），结果表明，葛根素峰面积与进样量在0.111 2～2.224 ?g范围内呈良好线性关系。
3.2.3 样品含量测定 精密吸取水提工艺正交试验样品液10 mL，置50 mL容量瓶中，加30%乙醇定容，摇匀，微孔滤膜（0.45 ?m）滤过，取续滤液，即得供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 ?L，注入液相色谱仪，测定。色谱图见图3。
3.3 因素水平的确定
采用正交试验的方法，对影响提取效果的主要因素煎煮次数、加水量、煎煮时间进行考察，采用L9（34）正交表进行考察。因素水平表见表4。
3.4 水提工艺正交试验及方差分析
按处方比例称取丹参药渣及葛根等7味药材，按正交设计表L9（34）进行煎煮提取、过滤，合并滤液，滤液浓缩并定容至500 mL，即得供试品溶液。取供试品溶液各20 mL，分别置于已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，残渣于105 ℃烘箱中干燥3 h，取出，置干燥器中冷却30 min，迅速精密称重，记录重量，计算干膏收率[8]。以丹参素含量、葛根素含量及干膏收率三者综合加权评分为指标，考察各因素对提取工艺的影响。综合评分=（丹参素含量/丹参素含量最大值）×40+（葛根素含量/葛根素含量最大值）×40+（干膏收率/干膏收率最大值）×20。正交试验结果见表5，方差分析见表6。
极差R值显示，水提效果的影响因素顺序为：C（提取次数）>A（加水量）>B（提取时间）。影响提取效果的方差分析中，由于B因素的离差平方和比空白列的离差平方和小，为了方差分析的准确度将其合并到误差项中，同时自由度也一并合并，结果C对提取效果有显著影响，A和B对提取效果无显著影响，考虑到实际生产，缩短生产周期，降低生产成本等综合因素，确定水提工艺为A1B1C3，即加8倍量的水，提取3次，每次45 min。
3.5 水提工艺验证试验
按处方比例的5倍量称取丹参、葛根等7味药材于圆底烧瓶中，加入8倍量，煎煮3次，每次提取45 min，滤过，滤液合并，将药液浓缩定容至500 mL。测定葛根素、丹参素的含量和干膏收率，结果见表7。表明优选的水提工艺稳定、合理、可行。
4 讨论
丹参中的水溶性成分丹酚酸B为丹参药材的含量控制成分，在加水煎煮时降解为丹参素和原儿茶醛[9]，其中水溶性成分丹参素具有活血化瘀及抗炎的功效[10]，结合本制剂的功效及临床应用，选定丹参素作为水提工艺的指控成分之一。
测定葛根素含量时，对不同比例的甲醇-水（25∶75、36∶64）流动相进行了考察，结果甲醇-水（25∶75）在对称性和分离度方面均优于甲醇-水（36∶64），因此，选择甲醇-水（25∶75）作流动相；也对3种不同长度的色谱柱（250 mm×4.6 mm、200 mm×4.6 mm、150 mm×4.6 mm）进行了考察，结果色谱柱越长，色谱图的基线越平，葛根素的理论塔板数越高，因此，选择250 mm×4.6 mm的长柱进行试验；对30%、45%、60%乙醇3种溶液稀释剂进行了考察，结果随着乙醇浓度的升高，供试品溶液的塔板数逐渐降低，因此，选择30%乙醇作为供试品溶液稀释剂。
本试验采用醇水双提进行提取工艺研究，得到的醇提和水提工艺条件经验证，稳定、合理、可行，为本制剂后续的研发提供了依据。
参考文献：
[1] 靳维荣，孙强，单成钢，等.丹参药材中丹参酮ⅡA含量测定方法改进[J].时珍国医国药，2010，21（7）：1672-1673.
[2] 徐淑卿，孙艳秋，陈桂范.用正交试验法优选丹参脂溶性成分的提取工藝[J].中成药，1999，21（3）：152-153.
[3] 强凤霞.正交设计法研究丹参酮最佳提取工艺[J].中国医学研究与临床，2003，11（1）：17-19.
[4] 张岱州，裴志东，李春雪，等.HPLC法测定消疲宁颗粒中丹参素钠含量[J].辽宁中医药大学学报，2010，7（12）：179-180.
[5] 王志朝，匡长春，李强.双丹胶囊的制备与质量标准研究[J].医药导报， 2007，11（26）：1344-1345.
[6] 芦志伟，李美珍，卢欣等.HPLC法测定参花通脉胶囊中丹参素钠的含量[J].天津医科大学学报，2012，2（18）：260-262.
[7] 徐强，章曙丹，冯瑛.HPLC测定糖肾颗粒中葛根素的含量[J].中成药， 2007，29（4）：622.
[8] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：附录ⅩA.
[9] 徐德然，王康才，王峥涛，等.丹参中丹参素、原儿茶醛来源的初步研究[J].中国天然药物，2005，3（3）：148-150.
[10] 刘海波，徐峻，彭勇，等.丹参活血化瘀活性成分的靶标[J].物理化学学报，2010，26（1）：199-205.
（收稿日期：2012-11-06，编辑：陈静）
关键词：心舒通颗粒；丹参酮ⅡA；丹参素；葛根素；提取工艺
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2013.03.024
中图分类号：R283.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2013）03-0062-04
心舒通颗粒为成都中医药大学附属医院的在研医院制剂，其处方源自国医大师郭子光教授治疗心血管疾病60年的临床经验总结，由丹参、葛根、川芎、苦参等7味药组成，具有益气活血、宽胸止痛等功效，临床用于无症状性心肌缺血、冠心病心绞痛、冠心病“搭桥”手术或“支架”后再阻塞等。在对本方进行剂型改进时，以确保疗效为前提，再结合制剂的使用、携带方便性考虑，确定将本处方开发成颗粒剂。先将丹参醇提，以丹参酮ⅡA含量为指标考察醇提工艺；然后将丹参药渣与其他药一起水提，将醇提后的药渣与葛根等药味混合水提，并将丹参素和臣药葛根中的葛根素含量作为指标考察水提工艺。通过正交试验优选提取工艺，为本制剂的规模化生产提供技术参数。
1 仪器与试药
HP-1100高效液相色谱仪（美国惠普）：四元梯度泵，自动进样器，柱温箱；BP211D电子分析天平（Sartorius，德国）；SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；RE-S2C旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）。
丹参酮ⅡA对照品（供含量测定用，批号110766-200619）、丹参素钠对照品（供含量测定用，批号110855-200809）、葛根素对照品（供含量测定用，批号110752-200712）均购于中国药品生物制品检定所；丹参（批号1201075）、葛根（批号1202086）、川芎（批号1201045）、苦参（批号1201036）、郁金（批号1201037）、薤白（批号1201035）、水蛭（批号1202023）均购于四川新荷花中药饮片股份有限公司，经成都中医药大学附属医院药剂科盛荣副主任中药师鉴定，符合2010年版《中华人民共和国药典》（一部）要求；甲醇为色谱纯，水为蒸馏水，其余均为分析纯。
2 醇提工艺正交试验
2.1 丹参酮ⅡA含量测定
2.1.1 色谱条件 色谱柱：Phenomenex C18（0DS，4.6 mm×250 mm，5 ?m）；流动相：甲醇-水（73∶27）[1]；流速：1.0 mL/min；柱温：30 ℃；进样量：10 ?L；检测波长：270 nm。理论板数按丹参酮ⅡA峰计不低于2 000。
2.1.2 线性关系考察 精密称取丹参酮ⅡA对照品9.56 mg，置于100 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成丹参酮ⅡA含量为0.095 6 mg/mL的对照品溶液。精密吸取丹参酮ⅡA对照品溶液2、3、5、10、20、25 mL置25 mL量瓶中，加甲醇定容，摇匀。按“2.1.1”项下色谱条件测定，以丹参酮ⅡA峰面积为纵坐标，浓度为横坐标进行线性回归。得回归方程：Y=55 643.97X+1.47（r=0.999 9）。结果表明，丹参酮ⅡA峰面积与进样量在0.076 48～0.956 0 ?g之间呈良好线性关系。
2.1.3 样品含量测定 精密吸取醇提工艺正交试验样品液2 mL，置25 mL量瓶中，加甲醇定容，摇匀，微孔滤膜（0.45 ?m）滤过，取续滤液，即得供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 ?L，注入液相色谱仪，测定。色谱图见图1。
2.2 因素水平的确定
根据预试结果及丹参药材的性质，以丹参酮ⅡA含量为考察指标，选定溶媒用量（A）、乙醇浓度（B）、提取时间（C）作为考察因素[2-3]，提取次数取2次，因素水平见表1。
2.3 醇提正交试验及方差分析
按处方比例称取丹参药材100 g，按L9（34）正交试验条件进行回流提取，滤过，合并滤液，滤液浓缩并定容至500 mL。正交试验结果见表2，方差分析见表3。
极差R值显示，各因素作用主次为：B（乙醇浓度）>A（溶媒用量）>C（提取时间）。影响提取效果的方差分析中，由于C因素的离差平方和比空白列的离差平方和小，为方差分析的准确度将其合并到误差项中，同时自由度也一并合并，结果显示，B对提取效果有显著影响，A和C对提取效果无显著影响，考虑到實际生产，缩短生产周期，降低生产成本等综合因素，确定丹参醇提工艺为A1B3C1，即加8倍80%乙醇，提取2次，每次提取45 min。
2.4 醇提工艺验证试验
称取3 倍处方量药材，按最佳提取工艺分别制备3批样品，结果表明，优选出的组合A1B3C1验证试验结果稳定，丹参酮ⅡA含量为1.313～1.389 mg/g。
3 水提工艺正交试验
3.1 丹参素的含量测定
3.1.1 色谱条件 色谱柱：依利特C18（BDS，4.6 mm×250 mm， 5 ?m）；流动相：甲醇-0.5%乙酸（11∶89）；流速：1.0 mL/min；柱温：30 ℃；进样量：10 ?L；检测波长：280 nm。理论塔板数按丹参素钠计不低于6 000[4-6]。
3.1.2 线性关系考察 精密称取丹参素钠对照品30.26 mg，置于50 mL量瓶中，加20%甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，制成0.605 2 mg/mL的对照品溶液。精密吸取丹参素钠对照品溶液2、3、5、10、25 mL置25 mL量瓶中，加20%甲醇定容，摇匀，即得。按“3.1.1”项下色谱条件测定，以丹参素钠峰面积为纵坐标，浓度为横坐标进行线性回归。得回归方程：Y=4 987.63X+6.87（r=0.999 9）。结果表明，丹参素钠峰面积与进样量在0.484 16～6.052 ?g之间呈良好线性关系。 3.1.3 样品含量测定 精密吸取水提工艺正交试验样品液10 mL，置50 mL容量瓶中，加甲醇定容，摇匀，微孔滤膜（0.45 ?m）滤过，取续滤液，即得供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 ?L，注入液相色谱仪，测定。色谱图见图2。
3.2 葛根素含量测定
3.2.1 色谱条件 色谱柱：Boston C18（ODS，4.6 mm×250 mm， 5 ?m）；流动相：甲醇-水（25∶75）[7]；流速：1.0 mL/min；柱温：30 ℃；进样量：5 ?L；检测波长：250 nm。理论塔板数按葛根素峰计不低于4 000。
3.2.2 线性关系的考察 精密称取葛根素对照品22.24 mg，置50 mL量瓶中，加30%乙醇溶解并定容至刻度，摇匀，制成0.444 8 mg/mL的对照品溶液。分别精密吸取对照品溶液1、2、3、5、10、20于20 mL容量瓶中，加30%乙醇定容，按“3.2.1”项下色谱条件测定。以葛根素峰面积为纵坐标，浓度为横坐标进行线性回归。得回归方程：Y=51 456.57X-57.563 5（r=0.999 9），结果表明，葛根素峰面积与进样量在0.111 2～2.224 ?g范围内呈良好线性关系。
3.2.3 样品含量测定 精密吸取水提工艺正交试验样品液10 mL，置50 mL容量瓶中，加30%乙醇定容，摇匀，微孔滤膜（0.45 ?m）滤过，取续滤液，即得供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 ?L，注入液相色谱仪，测定。色谱图见图3。
3.3 因素水平的确定
采用正交试验的方法，对影响提取效果的主要因素煎煮次数、加水量、煎煮时间进行考察，采用L9（34）正交表进行考察。因素水平表见表4。
3.4 水提工艺正交试验及方差分析
按处方比例称取丹参药渣及葛根等7味药材，按正交设计表L9（34）进行煎煮提取、过滤，合并滤液，滤液浓缩并定容至500 mL，即得供试品溶液。取供试品溶液各20 mL，分别置于已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，残渣于105 ℃烘箱中干燥3 h，取出，置干燥器中冷却30 min，迅速精密称重，记录重量，计算干膏收率[8]。以丹参素含量、葛根素含量及干膏收率三者综合加权评分为指标，考察各因素对提取工艺的影响。综合评分=（丹参素含量/丹参素含量最大值）×40+（葛根素含量/葛根素含量最大值）×40+（干膏收率/干膏收率最大值）×20。正交试验结果见表5，方差分析见表6。
极差R值显示，水提效果的影响因素顺序为：C（提取次数）>A（加水量）>B（提取时间）。影响提取效果的方差分析中，由于B因素的离差平方和比空白列的离差平方和小，为了方差分析的准确度将其合并到误差项中，同时自由度也一并合并，结果C对提取效果有显著影响，A和B对提取效果无显著影响，考虑到实际生产，缩短生产周期，降低生产成本等综合因素，确定水提工艺为A1B1C3，即加8倍量的水，提取3次，每次45 min。
3.5 水提工艺验证试验
按处方比例的5倍量称取丹参、葛根等7味药材于圆底烧瓶中，加入8倍量，煎煮3次，每次提取45 min，滤过，滤液合并，将药液浓缩定容至500 mL。测定葛根素、丹参素的含量和干膏收率，结果见表7。表明优选的水提工艺稳定、合理、可行。
4 讨论
丹参中的水溶性成分丹酚酸B为丹参药材的含量控制成分，在加水煎煮时降解为丹参素和原儿茶醛[9]，其中水溶性成分丹参素具有活血化瘀及抗炎的功效[10]，结合本制剂的功效及临床应用，选定丹参素作为水提工艺的指控成分之一。
测定葛根素含量时，对不同比例的甲醇-水（25∶75、36∶64）流动相进行了考察，结果甲醇-水（25∶75）在对称性和分离度方面均优于甲醇-水（36∶64），因此，选择甲醇-水（25∶75）作流动相；也对3种不同长度的色谱柱（250 mm×4.6 mm、200 mm×4.6 mm、150 mm×4.6 mm）进行了考察，结果色谱柱越长，色谱图的基线越平，葛根素的理论塔板数越高，因此，选择250 mm×4.6 mm的长柱进行试验；对30%、45%、60%乙醇3种溶液稀释剂进行了考察，结果随着乙醇浓度的升高，供试品溶液的塔板数逐渐降低，因此，选择30%乙醇作为供试品溶液稀释剂。
本试验采用醇水双提进行提取工艺研究，得到的醇提和水提工艺条件经验证，稳定、合理、可行，为本制剂后续的研发提供了依据。
参考文献：
[1] 靳维荣，孙强，单成钢，等.丹参药材中丹参酮ⅡA含量测定方法改进[J].时珍国医国药，2010，21（7）：1672-1673.
[2] 徐淑卿，孙艳秋，陈桂范.用正交试验法优选丹参脂溶性成分的提取工藝[J].中成药，1999，21（3）：152-153.
[3] 强凤霞.正交设计法研究丹参酮最佳提取工艺[J].中国医学研究与临床，2003，11（1）：17-19.
[4] 张岱州，裴志东，李春雪，等.HPLC法测定消疲宁颗粒中丹参素钠含量[J].辽宁中医药大学学报，2010，7（12）：179-180.
[5] 王志朝，匡长春，李强.双丹胶囊的制备与质量标准研究[J].医药导报， 2007，11（26）：1344-1345.
[6] 芦志伟，李美珍，卢欣等.HPLC法测定参花通脉胶囊中丹参素钠的含量[J].天津医科大学学报，2012，2（18）：260-262.
[7] 徐强，章曙丹，冯瑛.HPLC测定糖肾颗粒中葛根素的含量[J].中成药， 2007，29（4）：622.
[8] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：附录ⅩA.
[9] 徐德然，王康才，王峥涛，等.丹参中丹参素、原儿茶醛来源的初步研究[J].中国天然药物，2005，3（3）：148-150.
[10] 刘海波，徐峻，彭勇，等.丹参活血化瘀活性成分的靶标[J].物理化学学报，2010，26（1）：199-205.
（收稿日期：2012-11-06，编辑：陈静）