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以甘油、油酸为原料，优化在无溶剂体系中以固定化脂肪酶Novo435催化合成甘油二酯（diglyceride，DAG）的工艺。系统考察底物摩尔比（油酸／甘油）、反应温度、时间和加酶量等因素对油酸转化率和甘油二酯含量影响的基础上，利用响应面试验设计优化各主效因子，并经回归分析获得最优的工艺条件。所得最优条件：油酸与甘油底物摩尔比2．27、反应温度48．14℃、反应时间6．3h、加酶量1．68％。在此条件下，实验测得油酸转化率为45．42％，甘油二酯质量分数为70．01％，与响应面模型预测值吻合。