D-阿洛酮糖3-差向异构酶在枯草芽孢杆菌中的表达

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D-阿洛酮糖3-差向异构酶(D-psicose 3-epimerase, DPE)可以催化D-果糖转化为稀有糖D-阿洛酮糖,是生产D-阿洛酮糖过程中的关键酶。为了提高DPE的表达水平,该研究以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) WB800为宿主菌,异源表达Clostridium scindens ATCC 35704来源的DPE。首先,构建不同单启动子和串联启动子介导DPE表达的重组菌,通过摇瓶培养,发现由单启动子Phag介导的重组菌株经发酵后酶活力最高,最高酶活力为19.62 U/mL,是P43介导的原始菌株酶活力的1.3倍。最后对Phag的核糖体结合位点(ribosome binding site, RBS)序列进行突变,突变后的菌株酶活力再次提高了29.4%,是原始菌株酶活力的1.69倍。该研究结果为工业化生产DPE提供了方法学参考。
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