【摘 要】
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目的 探索不同M型胆碱能受体对脂多糖诱导的脓毒症小鼠模型调控炎症反应的可能机制.方法 C57雄性小鼠随机分为正常对照组、LPS组、哌仑西平组和AF-DX116组.正常对照组小鼠在
【机 构】
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北京世纪坛医院急诊科,北京,100038;北京大学第九临床学院,北京,100038;
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目的 探索不同M型胆碱能受体对脂多糖诱导的脓毒症小鼠模型调控炎症反应的可能机制.方法 C57雄性小鼠随机分为正常对照组、LPS组、哌仑西平组和AF-DX116组.正常对照组小鼠在实验开始0h及0.5h均腹腔注射生理盐水;LPS组、哌仑西平组、AF-DX116组小鼠在实验开始0.5h均腹腔注射LPS制造小鼠脓毒症模型,分别在实验开始0h给予生理盐水、选择性M1型胆碱能受体阻滞剂哌仑西平、选择性M2型胆碱能受体阻滞剂AF-DX116预处理.分别在注射LPS后2h及12 h处死小鼠,获取小鼠肝肺组织,采用流式细胞学技术检测组织巨噬细胞的极化情况;免疫荧光双染法检测巨噬细胞的极化情况;PCR法检测肝肺组织SOCS3基因的表达情况.结果 流式细胞学结果提示,与LPS组比较,哌仑西平预处理后脓毒症小鼠肝肺组织M1型巨噬细胞比例降低,在肺脏12 h组(3.00±0.25 vs.3.98±0.38,P＜0.01)、肝脏2h组(3.50±1.34 vs.5.20±0.59,P＜0.01)及肝脏12 h组(4.50±0.42 vs.5.54±0.52,P＜0.05)中差异有统计学意义;而AF-DX1 16预处理后,可促进脓毒症小鼠模型巨噬细胞向M1型极化,其中在肺脏2h组(5.12±1.94 vs.3.64±0.41,P＜0.01)、肺脏12 h组(4.63 ±1.07 vs.3.98±0.38,P＜0.05)及肝脏12 h组(7.68±1.81 vs.5.54±0.52,P＜0.01)中差异有统计学意义.免疫荧光双染结果提示,哌仑西平预处理组小鼠肝脏及肺脏组织M1型巨噬细胞浸润程度较低,而AF-DX116预处理组小鼠肝肺组织M1型巨噬细胞浸润程度增加.PCR结果提示,与LPS组比较,选择性M1型胆碱能受体阻滞剂哌仑西平预处理可抑制脓毒症小鼠肝肺组织SOCS3分子基因的表达水平(肺脏2h组,4.91±0.35 vs.5.69 ±0.64,P＜0.01),而选择性M2型胆碱能受体阻滞剂AF-DX116预处理则作用相反(肺脏2h组,6.73±0.11 vs.5.69±0.64,P＜0.05).结论 不同的M型胆碱能受体亚型在巨噬细胞的极化过程中发挥了不同的作用.
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