中华蜜蜂AcerOr1基因昆虫表达载体pIB/V5-His的构建及功能分析

来源 :福建农业学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yanlei3352

【摘要】

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【目的】构建能在Sf9昆虫细胞中稳定高效表达中华蜜蜂气味受体AcerOr1的重组表达载体,并对其功能进行分析。【方法】将目的基因AcerOr1和昆虫表达载体pIB/V5-His载体用Bam HI

【作者】

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郭丽娜赵慧婷任有蛇徐兵姜玉锁

【机构】

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山西农业大学动物科技学院,山西农业大学生命科学学院,山西农业大学工学院

【出处】

：

福建农业学报

【发表日期】

：

2020年4期

【关键词】

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中华蜜蜂气味受体AcerOr1 pIB/V5-His 表达亚细胞定位功能分析 Apis ceranaolfactory receptor AcerOr1p

【基金项目】

：

山西农业大学校青年科技创新项目(J141902180),山西省“1331工程”高校科技创新项目(J241942004),优秀博士来晋奖励项目(K271899063)

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【目的】构建能在Sf9昆虫细胞中稳定高效表达中华蜜蜂气味受体AcerOr1的重组表达载体,并对其功能进行分析。【方法】将目的基因AcerOr1和昆虫表达载体pIB/V5-His载体用Bam HI和EcoRI做双酶切,通过T4 DNA连接酶构建成含目的基因AcerOr1的表达载体pIB/V5-AcerOr1。将重组表达载体用脂质体转染的方法转染至Sf9细胞中,利用免疫荧光和Western blot检测AcerOr1蛋白的亚细胞定位和表达情况;利用全波长多功能酶标仪检测该受体对4种花香物质刺激后细胞内Ca2+

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