【摘 要】
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目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)RP11-789C1.1通过Wnt/β-连环蛋白(catenin)信号通路靶向miR-558对皮肤鳞癌细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响.方法 qRT-PCR检测人正常角化细胞HaCaT和3种皮肤鳞癌细胞(A431、SCL-1和COLO16)中RP11-789C1.1和miR-558的表达水平.以A431为研究对象,构建过表达RP11-789C1.1的皮肤鳞癌细胞株.细胞计数(CCK-8)试剂盒检测细胞活力;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;流式细胞术
【机 构】
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南阳市中心医院皮肤科,河南 南阳 473000
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目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)RP11-789C1.1通过Wnt/β-连环蛋白(catenin)信号通路靶向miR-558对皮肤鳞癌细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响.方法 qRT-PCR检测人正常角化细胞HaCaT和3种皮肤鳞癌细胞(A431、SCL-1和COLO16)中RP11-789C1.1和miR-558的表达水平.以A431为研究对象,构建过表达RP11-789C1.1的皮肤鳞癌细胞株.细胞计数(CCK-8)试剂盒检测细胞活力;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡;Western印迹检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达水平.双荧光素酶报告基因实验和RT-qPCR验证RP11-789C1.1和miR-558的靶向调控关系.结果 与HaCaT细胞比较,3种皮肤鳞癌细胞中RP11-789C1.1的表达水平显著降低,miR-558的表达水平显著升高(均P<0.05).过表达RP11-789C1.1可显著抑制A431细胞增殖、迁移、侵袭、β-catenin、c-Myc和survivin蛋白的表达,促进细胞凋亡(均P<0.05).miR-558是RP11-789C1.1的靶基因,RP11-789C1.1可负性调控miR-558表达.过表达miR-558可逆转RP11-789C1.1对A431细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡及Wnt/β-catenin信号通路的影响(P<0.05).结论 RP11-789C1.1通过下调miR-558表达,抑制Wnt/β-catenin信号通路,进而抑制皮肤鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭并促进其凋亡.
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从科学思维培养的角度讨论物理实验教学的作用和价值,从三个方面提出了发挥实验教学价值的建议.
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